Suvli normal fazali xromatografiya - Aqueous normal-phase chromatography

Suvli normal fazali xromatografiya (ANP) a xromatografik o'z ichiga olgan texnika mobil faza orasidagi mintaqa teskari fazali xromatografiya (RP) va organik normal fazali xromatografiya (ONP).

Printsip

Oddiy fazali xromatografiyada statsionar faza bu qutbli va mobil faza qutbsiz. Orqaga olingan bosqichda bizda buning aksi bor; harakatsiz faza qutbsiz, harakatlanuvchi faza qutbli. Oddiy fazali xromatografiya uchun odatiy statsionar fazalar kremniy yoki organik qismlardir siyano va amino funktsional guruhlar. Teskari bosqich uchun, alkil uglevodorodlar afzal qilingan statsionar fazadir; oktadesil (C18) eng keng tarqalgan statsionar fazadir, ammo ba'zi dasturlarda oktil (C8) va butil (C4) ham qo'llaniladi. Qaytgan fazali materiallarning belgilari uglevodorod zanjirining uzunligini anglatadi.

Oddiy fazali xromatografiyada eng kichik qutbli birikmalar avval elute va eng qutbli birikmalar oxirgi elute qilinadi. Ko'chma faza kabi qutbsiz erituvchidan iborat geksan yoki geptan kabi biroz ko'proq qutbli erituvchi bilan aralashtiriladi izopropanol, etil asetat yoki xloroform. Tutilish kamayadi, harakatlanuvchi fazadagi qutbli erituvchi miqdori oshadi. Teskari fazali xromatografiyada eng qutbli birikmalar elute birinchi navbatda, eng ko'p bo'lmagan qutbsiz birikmalar bilan ajralib turadi Ko'chma faza odatda suvning ikkilik aralashmasi va o'xshash qutbli organik erituvchidir metanol, asetonitril yoki THF. Tutilish ko'chma fazadagi qutbli erituvchi (suv) miqdori oshgani sayin ortib boradi. Oddiy fazali xromatografiya, an adsorptiv mexanizmi, aminlar, kislotalar, metall komplekslari va boshqalar kabi qutbli farqlari asosida organik erituvchilarda osonlikcha eriydigan eritmalarni tahlil qilish uchun ishlatiladi. Qaytgan fazali xromatografiya, bo'linish mexanizmi, odatda qutbsiz bo'linish uchun ishlatiladi. farqlar.

"Gidrid yuzasi" qo'llab-quvvatlovchi materialni boshqa silika materiallaridan ajratib turadi; xromatografiya uchun ishlatiladigan ko'pgina silika materiallari asosan yuzadan iborat silanollar (-Si-OH). "Gidrid yuzasida" terminal guruhlari asosan -Si-H ni tashkil qiladi. Gidrid yuzasi ham funktsional bo'lishi mumkin karbon kislotalari^[1] va uzun zanjirli alkil guruhlari.^[2] ANPC uchun mobil fazalar oz miqdordagi suv bilan organik erituvchiga (masalan, metanol yoki asetonitril) asoslangan; Shunday qilib, mobil faza "suvli" (suv mavjud) va "normal" (statsionar fazaga qaraganda kamroq qutbli). Shunday qilib, qutbli eritmalar (masalan, kislotalar va ominlar) eng kuchli saqlanib qoladi, harakatchan fazadagi suv miqdori oshgani sayin retentsiya kamayadi.

Odatda harakatlanuvchi fazadagi qutbsiz komponentning miqdori 60% yoki undan ko'p bo'lishi kerak, bu eritma va harakatlanuvchi fazaning organik tarkibiy qismiga qarab ushlab turishning aniq nuqtasi bilan aniqlanadi. Haqiqiy ANP statsionar fazasi ham teskari fazada, ham normal faza rejimlarida faqat elitentdagi suv miqdori o'zgarib turishi bilan ishlaydi. Shunday qilib, erituvchilarning doimiyligi 100% suvdan toza organikgacha ishlatilishi mumkin. ANP tutilishi gidrid asosidagi statsionar fazalardagi turli xil qutbli birikmalar uchun isbotlangan. Yaqinda o'tkazilgan tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, silika gidridli materiallar 6-8 monolayerdan iborat bo'lishi mumkin bo'lgan HILIC fazalariga nisbatan juda yupqa suv qatlamiga ega (0,5 ga yaqin bir qatlam).^[3] Bundan tashqari, gidrid fazalari yuzasida sezilarli manfiy zaryad silanollardan ko'ra erituvchidan gidroksid ionlarining adsorbsiyasi natijasidir.^[4]

Xususiyatlari

Ushbu fazalarning qiziqarli xususiyati shundaki, qutbli va qutbsiz birikmalar mobil faza tarkibining ba'zi bir oralig'ida (organik / suvli) saqlanib qolishi mumkin. Yaqinda qutbli birikmalarning tutilish mexanizmi kremniy gidrid yuzasida gidroksid qatlami hosil bo'lishining natijasi ekanligi isbotlandi.^[5] Shunday qilib, musbat zaryadlangan analitiklar manfiy zaryadlangan yuzaga tortiladi va boshqa qutbli analitiklar gidroksid yoki boshqa zaryadlangan turlarning sirt ustida siljishi natijasida saqlanib qolishi mumkin. Ushbu xususiyat uni toza HILIC (gidrofilik o'zaro bog'liqlik xromatografiyasi) ustunlaridan ajratib turadi, bu erda qutblar farqi bilan ajratish sirtdagi suvga boy qatlamga bo'linish yo'li bilan olinadi yoki sof RP statsionar faza, unda eruvchan moddalardagi qutbsiz farqlar bilan ajratish juda cheklangan ikkinchi darajali mexanizmlar ishlaydi.

Gidridga asoslangan fazalarning yana bir muhim xususiyati shundaki, ko'plab tahlillar uchun asoslar kabi qutbli birikmalarni tahlil qilish uchun odatda yuqori pH harakatchan fazadan foydalanish shart emas. Ko'chma fazaning suvli komponenti odatda 0,1 dan 0,5% gacha formik yoki sirka kislotasi, bu massa spektral analizini o'z ichiga olgan detektor texnikasi bilan mos keladi.

Adabiyotlar

1. ^ J.J. Pesek, M.T. Matyska, LCGC, 24 (2006) 296
2. ^ Pesek, J. J .; Matyska, M. T .; Prabhakaran, S. J. (2005). "Alkidlar va dienlarni gidrosilatsiya qilish yo'li bilan gidrid sirtlarida kimyoviy bog'langan statsionar fazalarni sintezi va tavsifi". Separation Science jurnali. 28 (18): 2437–43. doi:10.1002 / jssc.200500249. PMID  16405172.
3. ^ Pesek, J. J .; Matyska, M. T .; Gangaxedkar, S .; Siddiq, R. (2006). "Gidrid yuzasida karboksilik kislota fazalarini sintezi va HPLC bahosi". Separation Science jurnali. 29 (6): 872–80. doi:10.1002 / jssc.200500433. PMID  16830499.
4. ^ Xemstrem, P .; Irgum, K. (2006). "Gidrofil o'zaro ta'sir kromatografiyasi". Separation Science jurnali. 29 (12): 1784–821. doi:10.1002 / jssc.200600199. PMID  16970185.
5. ^ C. Kulsing, Y. Nolvachay, PJ Marriott, R. Boyson, M.T. Matyska, J.J. Pesek, M.T.V. Xearn, J. Fiz. Chem B, 119 (2015) 3063-3069.
6. ^ J. Soukup, P. Janas, P. Jandera, J. Xromatogr. A, 1286 (2013) 111-118