KALUKS - CALUX

Kimyoviy faollashtirilgan LUciferase geni eXpression (CALUX) ligandga bog'liq yadro retseptorlari asosida bioassay namunalarda aniq kimyoviy moddalar yoki kimyoviy moddalar sinfini aniqlashda ishlatiladi. U a bilan barqaror ravishda o'tkazilgan o'zgartirilgan hujayra chizig'idan iborat DNK tuzilishi bilan lusiferaza muxbir gen retseptorlarga xos DNK nazorati ostida javob elementlari bu rag'batlantirishi mumkin transkripsiya kiritilgan lusiferaza gen va osonlikcha o'lchanadigan yorug'lik hosil qiluvchi fermentni ishlab chiqaring. DNKning javob elementlari boshqa retseptorlari uchun bog'lanish joylarini ta'minlash uchun har xil bo'lishi mumkin, ular aniqlanishi kerak bo'lgan kimyoviy yoki kimyoviy moddalar sinfi tomonidan boshqariladi. Shunday qilib, turli xil kimyoviy moddalarni aniqlash uchun ko'plab CALUX bioassaylari ishlab chiqilgan. Ko'pgina dasturlar atrof-muhitga zararli kimyoviy moddalarni, masalan, endokrin tizimga ta'sir qiluvchi moddalarni aniqlashga qaratilgan (atrof-muhit gormonlari ).

CALUX - bu effektga asoslangan skrining usuli, chunki u umumiy effektni o'lchaydi ligandlar (namunadan) ma'lum bir retseptorga ega. Aksincha kimyoviy tahlil Shunday qilib, CALUX qiziqish retseptoridagi umumiy faollikni o'lchashga qodir. Bunga aniqlangan va aniqlanmagan aktivatorlar kiradi (agonistlar ) va inhibitorlar (retseptorlari antagonistlari ).

Ilovalar

Odatda aril uglevodorod retseptorlari (AhR) javob beradigan (AhR-CALUX) bioassay odatda dioksinlar va dioksinga o'xshash birikmalar namunaviy ekstraktlarda. Bu molekulyar mexanizmga asoslanadi AhR gen ekspressionini faollashtiradi.[1]AhR-CALUX tadqiqotchilar va kompaniyalar mavjudligini tekshirishni istagan kompaniyalar tomonidan qo'llaniladi dioksinlar va dioksinga o'xshash birikmalar ularning xavfsizligi va / yoki ifloslanish darajasini baholash uchun turli xil biologik va atrof-muhit matritsalarida, savdo va iste'mol mahsulotlarida, oziq-ovqat va ozuqada. [2] AhR-CALUX bioassayidan foydalangan holda namuna ekstrakti tarkibidagi dioksin va unga aloqador dioksinga o'xshash kimyoviy moddalarni o'lchash gaz xromatografiyasini talab qiladigan kimyoviy tahlilga qaraganda ancha arzon - yuqori aniqlikdagi mass-spektrometriya (GC-HRMS), bu faqat o'lchovni ta'minlaydi Namuna ekstrakti tarkibidagi AhR-faol dioksinlar va tegishli dioksinga o'xshash kimyoviy moddalarning umumiy darajasi va o'ziga xos kongenerlarni aniqlash har qanday GC-HRMS tahlilini talab qiladi. Bundan tashqari, inson sog'lig'i va kasalliklarida AhRning yaqinda tashkil etilgan rolini hisobga olgan holda, AhR-CALUX biosayzasi insonning potentsial terapevtik dori vositalari sifatida AhR-faol kimyoviy moddalarni aniqlash va tavsiflash uchun yuqori samaradorlik skrining usuli sifatida keng qo'llanilmoqda.[3]

Jinsiy gormonga o'xshash faoliyatga ega bo'lgan atrof-muhit kimyoviy moddalari shu kabi bioassaylar, shu jumladan, Estrogen retseptorlari-sezgir CALUX (ER-CALUX) va Androgen retseptorlari-sezgir CALUX (AR-CALUX) tomonidan aniqlanadi.

Adabiyotlar

  1. ^ Murk, A.J .; J. Legler; XONIM. Denison; J.P.Giesy; C. van de Guchte; A. Brouwer (1996 yil 1 sentyabr). "Kimyoviy faol lusiferaza geni ekspressioni (CALUX): cho'kindi jinslar va gözenek suvlaridagi Ah retseptorlari faol birikmalari uchun yangi in-vitro bioassay". Asosiy va amaliy toksikologiya. 33 (2): 149–160. doi:10.1006 / faat.1996.0152. PMID  8812260.
  2. ^ Denison, M.S.; B. Chjao; D.S.Baston; G.C. Klark; H. Murata; D.-H. Xan (2004 yil 8-avgust). "Galogenlangan dioksinlarni va ularga tegishli kimyoviy moddalarni aniqlash va nisbiy miqdorini aniqlash uchun rekombinant hujayralar bioassay tizimlari". Talanta. 63 (5): 1123–1133. doi:10.1016 / j.talanta.2004.05.032. PMID  18969542.
  3. ^ Esser, C .; B.P. Lourens; D.H.Sherr; G.H. Perdyu; A. Puga; R. Barouki; X. Kumul (2018 yil 15-noyabr). "Eski retseptor, yangi fokuslar - Orol uglevodorod retseptorlari funktsiyalarining tobora kengayib borayotgan olami. AHRning 4-yig'ilishidan hisobot, 2018 yil 29⁻31 avgust, Frantsiya". Xalqaro molekulyar fanlar jurnali. 19 (11): E3603. doi:10.3390 / ijms19113603. PMC  6274973. PMID  30445691.