Kastle-Meyer sinovi - Kastle–Meyer test

The Kastle-Meyer sinovi a taxminiy qon birinchi marta 1903 yilda tasvirlangan sinov,[1] unda kimyoviy ko'rsatkich fenolftalein mavjudligini aniqlash uchun ishlatiladi gemoglobin. Bu ga tayanadi peroksidaza -gemoglobinning qondagi faolligi kabi kataliz qiling fenolftalinning oksidlanishi (fenolftaleinning rangsiz pasaytirilgan shakli) yorqin pushti rang sifatida ko'rinadigan fenolftaleinga aylanadi. Kastl-Meyer testi katalitik qon testining bir shakli bo'lib, odatda sud ekspertizasining ikkita asosiy sinfidan biri hisoblanadi. jinoyatchilik laboratoriyalari qonni kimyoviy identifikatsiyalashda. Shu maqsadda ishlatiladigan testlarning boshqa klassi mikrokristal kabi testlar Teichmann billuri sinov va Takayama billuri sinov.[2]

Sinov 1901 yilda xom qon testini ixtiro qilgan va sinovdan o'tkazgan amerikalik qishloq xo'jaligi kimyogari Jozef Xing Kastl (1864-1916) va testni o'zgartirgan nemis shifokori va kimyogari Erix Meyer (1874-1927) sharafiga nomlangan. 1903 yilda.[3]

Usul

Taxmin qilingan qon namunasi avval tampon bilan yig'iladi. Namunaga bir tomchi fenolftalein reaktivi, bir necha soniyadan keyin esa tomchi qo'shiladi vodorod peroksid tamponga qo'llaniladi. Agar tampon tezda pushti rangga aylansa, qon uchun taxminiy ijobiy deb aytiladi. 30 soniyadan ko'proq vaqt davomida kutish, ko'pchilik tamponlar tabiiy ravishda pushti rangga aylanadi, chunki ular havoda o'z-o'zidan oksidlanadi.[iqtibos kerak ]

Ixtiyoriy ravishda, avval tamponni bir tomchi etanol bilan davolash mumkin liza hujayralar mavjud bo'lib, sezgirlik va o'ziga xoslikni oshiradi. Ushbu test namunaga zarar etkazmaydi, uni saqlash va laboratoriyada keyingi sinovlarda ishlatish mumkin; ammo, ozgina laboratoriyalar Kastle-Meyer testi uchun ishlatilgan tamponni boshqa har qanday sinovlarda ishlatadilar, buning o'rniga asl dog'ning yangi tamponidan foydalanishni afzal ko'rishadi.[iqtibos kerak ]

Cheklovlar

Kastle-Meyer testi qonning suyultirilishini 1:10 gacha aniqlashga qodir ekanligi haqida xabar berilgan edi7, test uchun bir qator muhim cheklovlar mavjud. Mis va nikel tuzlari kabi kimyoviy oksidlovchilar Kastle-Meyer reaktivini vodorod peroksid qo'shilishidan oldin pushti rangga aylanishiga olib keladi, shuning uchun avval reaktivni qo'shib, keyin bir necha soniya kutib, so'ngra vodorod peroksidni qo'shish juda muhimdir.

Kastl-Meyer testi inson qoni bilan boshqa gemoglobin asosidagi qon bilan bir xil reaktsiyaga ega, shuning uchun tasdiqlovchi test, masalan Ouchterlony testi qon qaysi turlardan kelib chiqqanligi to'g'risida aniq xulosa chiqarish uchun bajarilishi kerak.

Rangli katalitik sinovlar juda sezgir, ammo o'ziga xos emas. Faqatgina ijobiy rang testi qonning ijobiy isboti sifatida talqin qilinmasligi kerak. Salbiy natija, odatda, gemning aniqlanadigan miqdori yo'qligining isboti hisoblanadi, ammo kamaytiruvchi vosita mavjudligida soxta salbiy hosil bo'lishi mumkin. Sinov qonda nima borligi haqida aniq dalillarni keltira olmaydi.

Mexanizm

Ushbu testda ishlatiladigan fenolftalein an'anaviy shaklidan o'zgartirilgan, chunki u shunday bo'lgan kamaytirilgan ikki elektron tomonidan ishqoriy eritmada oldindan eritiladi. Bunga odatda fenolftaleinning gidroksidi eritmasini kukunli rux bilan qaynatish orqali erishiladi, bu esa fenolftaleinni fenolftalinga kamaytiradi. Kamaygandan so'ng, fenolftaleinning kationli shaklidagi juda qizg'ish pushti rangi xira sariq rangga aylanadi. Kastl-Meyer test to'plamlarida mavjud bo'lgan bu fenolftaleinning shakli. Ijobiy testni ko'rsatadigan qizg'ish pushti rangni hosil qilish uchun kamaytirilgan fenolftalein bo'lishi kerak oksidlangan normal, rangli shakliga qaytish.

Tegishli reaktsiyada vodorod peroksid gemoglobin qonda. Fenolftalin bu jarayonda bevosita ishtirok etmaydi; aksincha, u elektronlarning tashqi manbai vazifasini bajaradi. Vodorod peroksid bilan reaktsiyasida, heme gemoglobin markazi a kabi harakat qiladi peroksidaza, peroksidni suvga kamaytirish. Ushbu faollik, o'z navbatida, fenolftalin bilan qayta ta'minlanadigan elektronlarning gemoglobinini susaytiradi. Gemoglobinga elektronlarni berish fenolftalinni zich rangdagi fenolftaleinga qaytaradi. Ferment omon qolgan ekan, gemning peroksid bilan reaktsiyasi katalitik, ushbu testni sinov po'stida mavjud bo'lgan oz miqdordagi qonga juda sezgir qiladi. Vujudga keladigan peroksidning gemoglobin bilan katalizlangan kamayishi quyidagi reaktsiyada ko'rsatilgan. Ikki elektron fenolftalin bilan ta'minlanadi:

HOOH + 2 e− + 2 H+ → 2 H2O

Reaktsiya jarayonida protonlarni iste'mol qilish eritmaning pH qiymatini oshirishga ta'sir qiladi, ammo ishlab chiqarilgan asos miqdori reaktiv aralashmasida mavjud bo'lgan asos miqdoriga nisbatan ahamiyatsiz.


Adabiyotlar

  1. ^ Kastle-Meyer testining tarixi: 1901 yilda, Jozef Xing Kastl va Oliver Mart Shedd AQShda biologik material fenolftalinning ozgina ishqoriy eritmalarda fenolftaleinga oksidlanishiga olib kelishi mumkinligini aniqladi. [Qarang: Jozef X. Kastl va Oliver Mart Shedd (1901) "Fenolftalin oksidlovchi fermentlar uchun reaktiv sifatida" Amerika kimyoviy jurnali, 26 (6): 526-539.] 1903 yilda, Erix Meyer Germaniyada qon hujayralari ham reaktsiyaga sabab bo'lishi mumkinligini aniqladi. [Qarang: Erix Meyer (1903) "Beiträge zur Leykotsittenfrage. Fermente der Leukocyten" [Leykotsitlar savoliga qo'shgan hissalari. Leykotsitlar fermentlari], Myunxen Medizinische Wochenschrift, 50 (35): 1489–1493; ayniqsa, 1492-1493-betlarga qarang.] 1906 yilda Kastle va Amoss qondagi gemoglobin reaktsiyaga sabab bo'lganligini aniqladilar. [Qarang: Jozef H. Kastle va Xarold Lindsay Amoss, Sog'lik va kasallikdagi qonning peroksidaza faolligining o'zgarishi. BIZ. 31-gigienik laboratoriya byulleteni. (Vashington, DC: AQSh jamoat salomatligi va dengiz kasalxonasi xizmati, AQSh hukumati. Matbaa idorasi, 1906).] 1909 yilda Kastle test juda suyultirilgan qon namunalariga sezgir ekanligini aniqladi. [Qarang: Jozef H. Kastle, Qon uchun kimyoviy testlar. AQSh gigienik laboratoriyasining 51-sonli byulleteni. (Vashington, DC: AQSh jamoat salomatligi va dengiz kasalxonasi xizmati, AQSh hukumati. Matbaa idorasi, 1909).] Ammo, 1908 yilda Pozzi-Eskot (u o'sha paytgacha Peru, Limada yashagan) test sinovi noto'g'ri ekanligini aniqladi. qondan tashqari bir qator moddalarga javoban ijobiy reaktsiyalar. [Qarang: Marius Emmanuel Pozzi-Esko (1908) "Emploi de la phénolphtaline comme reactif du kuyladi [Fenolftalinni qon uchun reaktiv sifatida ishlatish], " Bulletin des Sociétés Chimiques Belges, 22 (11): 415-416.] Kastl-Meyer sinovi tarixi haqida batafsil ma'lumot uchun qarang: Robert E. Gaensslen, Sud serologiyasi, immunologiya va biokimyo bo'yicha manbalar kitobi (1989 yil nashr) (Vashington, D.C .: Adliya milliy instituti, AQSh Adliya vazirligi, 1983), 103–105 betlar. Onlayn rejimda mavjud.
  2. ^ Meyers, Tomas S (2006). "21-bob: serologiya". Yilda Vecht, Kiril H.; Rago, Jon T. (tahr.). Sud ekspertizasi va huquqi: Jinoyat, fuqarolik va oilaviy sud ishlarida tergov qo'llanmalari. Boka Raton, FL: CRC Press. 410-412 betlar. ISBN  0-8493-1970-6.
  3. ^ Meyers, Tomas S (2006). "21-bob: serologiya". Yilda Vecht, Kiril H.; Rago, Jon T. (tahr.). Sud ekspertizasi va huquqi: Jinoyat, fuqarolik va oilaviy sud ishlarida tergov qo'llanmalari. Boka Raton, FL: CRC Press. 410-412 betlar. ISBN  0-8493-1970-6.

Boshqa manbalar

  • Kulliford, Brayan J., Jinoyatchilik laboratoriyasida qon izlarini tekshirish va tipirovkalash, Vashington, Kolumbiya okrugi: AQSh hukumatining bosmaxonasi, 1971 yil.
  • Gaensslen, Robert E., Sud-serologiya, immunologiya va biokimyo bo'yicha manbalar kitobi, Vashington, Kolumbiya okrugi: AQSh hukumatining bosmaxonasi, 1983 y.
  • Kirk, Pol L., Jinoyatlarni tergov qilish, John Wiley va Son, 1974 yil.
  • Metropolitan Politsiya sud-tibbiyot laboratoriyasi, Biologiya usullari bo'yicha qo'llanma, 1978.
  • Ponce, Ana Kastello; Paskal, Fernando A. Verdu, "Qon izlari uchun taxminiy testlarni tanqidiy qayta ko'rib chiqish" Sud-tibbiyot aloqalari, jild 1, № 2, 1999 yil iyul, 1–15 betlar.
  • Safershteyn, Richard, Sud ekspertizasi bo'yicha qo'llanma, Prentice Hall, Inc., 1982 yil.