Fosfamin kislotasini tahlil qilish - Phosphoamino acid analysis - Wikipedia

Fosfamin kislotasini tahlil qilish, yoki PAA, ishlatiladigan eksperimental texnikadir molekulyar biologiya qaysi aminokislota yoki kislotalar ekanligini aniqlash uchun fosforillangan oqsilda.

Texnik

Oqsil avval fosforillanadi ³²Odatda an. Orqali P-etiketli ATP in vitro kinaz tahlillari. Oqsil tarkibidagi aminokislotalarning aksariyati, odatda, masalan, kuchli kislota yordamida gidrolizlanadi xlorid kislota. Keyin ushbu aminokislotalar 2 o'lchovli yordamida ajratiladi yupqa qatlamli xromatografiya, eukaryotlarda fosforillangan uchta aminokislotaning aminokislota standartlari bilan bir qatorda: serin, treonin va tirozin. Ushbu aminokislota standartlarini ta'sir qilish orqali TLC substratida ingl ninhidrin, bu aminokislotalarni ~ 100 ° C da qizdirilganda ko'rinadigan binafsha rangga bo'yaladi. Radioaktiv aminokislotalarni avtoradiografiya orqali aniqlash mumkin va ikkala rasmning ustki qatlami qaysi aminokislotalarning fosforillanganligini ko'rsatadi.

Adabiyotlar

• Rotberg, PG, Harris, TJ, Nomoto, A. va Vimmer, E. (1978) O4- (5'-uridilil) tirozin genom bilan bog'langan oqsil va poliovirus RNK o'rtasidagi aloqadir. Proc. Natl. Akad. Ilmiy ish. AQSH 75, 4868-4872.
• Ekxart, V., Xatchinson, MA va Hunter, T. (1979) T antigen immunoprecipitatlaridagi polioma tarkibidagi tirozinni fosforlashtiruvchi faollik. Hujayra 18, 925-933.