Retrograd kuzatuv - Retrograde tracing
Retrograd kuzatuv da ishlatiladigan tadqiqot usuli hisoblanadi nevrologiya tugatish nuqtasidan asabiy aloqalarni kuzatib borish (the sinaps ) manbalariga ( hujayra tanasi ). Retrograd kuzatuv texnikasi neyronlarning maqsadli populyatsiyasi va ularning kiritmalari o'rtasidagi neyronlarning aloqalarini batafsil baholashga imkon beradi asab tizimi. Ushbu metodlar ma'lum bir tuzilishdagi neyronlar orasidagi bog'lanishlarni "xaritalashga" imkon beradi (masalan ko'z ) va nishon neyronlari miya. Qarama-qarshi usul anterograd kuzatuvi, bu ularning manbasidan tortib to tugash nuqtasigacha (ya'ni hujayra tanasidan sinapsgacha) bo'lgan asabiy aloqalarni kuzatishda ishlatiladi. Anterograd va retrograd kuzatuv texnikasi ham ingl aksonal transport.
Texnikalar
Retrograd kuzatuvga turli xil vositalar orqali erishish mumkin, shu jumladan virusli shtammlardan hujayraning in'ektsiya joyiga ulanish belgisi sifatida. Masalan, pseudorabies virusi (PRV; Bartha shtamm), infektsiyaning sinaptik bog'langan neyronlar yo'li orqali oqim bo'ylab tarqalishiga va shu sababli ularning elektron tizimining mohiyatini ochib berishga moyilligi sababli mos iz qoldiruvchi sifatida ishlatilishi mumkin.[1][2]
Quturgan yuqtirgan hujayralarga zarar darajasi pastligi, faqat neyronlarni yuqtirishning o'ziga xos xususiyati va neyronlar orasida viruslarning sinaptik mintaqalarga tarqalishini qat'iy cheklaganligi sababli ushbu davriy kuzatuv tizimi uchun samarali ekanligi isbotlangan.[3] Ushbu omillar hujayralardagi jismoniy shikastlanmasdan sxemadagi individual neyron aloqalarini ochib beradigan juda aniq izlarni olish imkonini beradi.
Yana bir usul maxsus "boncuklar" ni in'ektsiya qilishni o'z ichiga oladi miya anestezi qilingan hayvonlarning yadrolari.[4] Hayvonlar bir necha kun omon qolishlariga ruxsat beriladi va keyin evtanizatsiya qilinadi. Proektsiyaning kelib chiqishi hujayralari teskari yo'nalish orqali ingl lyuminestsentsiya mikroskopi.
Wickersham va uning hamkasblari tomonidan maxsus texnik ishlab chiqilgan bo'lib, u o'zgartirilganlarni ishlatgan quturish virus. Ushbu virus bitta hujayraga zarar etkazishi va bitta sinaps bo'ylab sakrashi mumkin edi; bu tadqiqotchilarga neyronlarning mahalliy aloqasini tekshirishga imkon berdi.[5]
Quturish virusi
Da olib borilgandan keyin sinaptik terminal yoki akson maqsadli neyronning quturish virusi bilan o'ralgan pufakcha aksonal orqali hujayra tanasiga yo'naltiriladi dynein. In yovvoyi tur quturish virusi, virus butun miyaga tizimli ravishda yuqtirilguniga qadar replikatsiya va markaziy asab tizimida tarqalishda davom etadi.[3] Glikoprotein (G oqsili) ni quturgan genni yo'q qilish virusni dastlab yuqtirgan hujayralarga tarqalishini cheklaydi. Virusning transsinaptik tarqalishi G oqsilini psevdotiplash va genni ostiga qo'yish orqali kelib chiqishi neyronga monosinaptik yuqish bilan cheklanishi mumkin. Cre -boshqaruv. Ushbu virusli tarqalish floresans genini qo'shish kabi usullar bilan ingl yashil lyuminestsent oqsil virusga kasseta yoki orqali immunohistokimyo.[6][7]
Pseudorabies virusi
A'zosi herpesviridae oila, pseudorabies virus CNS orqali retrograd va anterograd tarzida tarqalib, retrograd dasturida neyron aksonini somaga va dendritlarga ko'taradi. PRV-Bartha psevdorabiya shtammidagi uchta asosiy membrana oqsil genini yo'q qilish virusning anterograd tarqalishini bloklaydi va floresans kabi virusli DNKga qo'shimcha manipulyatsiya qilish imkonini beradi, bu esa retrograd sxemani kuzatishga imkon beradi.[8]
Ftor-oltin
Ftor-Oltin, shuningdek, ma'lum gidroksistilbamidin, virusli bo'lmagan lyuminestsent retrograd izdosh bo'lib, uning akson bo'ylab harakatlanishi va dendritik daraxt bo'ylab harakatlanishi lyuminestsent mikroskopi yoki immunohistokimyo orqali ingl.[9]
Shuningdek qarang
Adabiyotlar
- ^ O'Donnell, P.; Lavin, A .; Enquist, L. V .; Greys, A. A .; Card, J. P. (1997). "Pseudorabies virusini retrograd transynaptik tashish natijasida aniqlangan kalamush yadrosi va talamus o'rtasidagi o'zaro bog'liq parallel zanjirlar". Neuroscience jurnali. 17 (6): 2143–2167. doi:10.1523 / jneurosci.17-06-02143.1997.
- ^ Luo, A. H .; Aston-Jons, G. (2009). "Supraxiyazmatik yadrodan ventral tegmental maydonga o'tish davri: yangi sirkadiyalik chiqish yo'li". Evropa nevrologiya jurnali. 29 (4): 748–760. doi:10.1111 / j.1460-9568.2008.06606.x. PMC 3649071. PMID 19200068.
- ^ a b Devis, Benjamin M.; Rall, Glenn F.; Schnell, Mattias J. (2015-11-06). "Siz quturgan virus haqida doimo bilishni istagan barcha narsalaringiz (lekin so'rashdan qo'rqgansiz)". Virusologiyani yillik sharhi. 2 (1): 451–71. doi:10.1146 / annurev-virology-100114-055157. PMC 6842493. PMID 26958924.
- ^ Kats, L. C .; Burkhalter, A .; Dreyer, V. J. (1984-08-09). "Vizual korteksni in vivo va in vitro tadqiqotlar uchun retrograd neyronal marker sifatida lyuminestsent lateks mikrosferalari". Tabiat. 310 (5977): 498–500. Bibcode:1984 yil natur.310..498K. doi:10.1038 / 310498a0. PMID 6205278.
- ^ Wickersham IR, Lion DC, Barnard RJ va boshq. (2007 yil mart). "Yagona, genetik maqsadli neyronlardan transsinaptik izlarni monosinaptik cheklash". Neyron. 53 (5): 639–47. doi:10.1016 / j.neuron.2007.01.033. PMC 2629495. PMID 17329205.
- ^ TotalBoox; TBX (2011-01-01). Quturish kasalligi bo'yicha tadqiqot yutuqlari. Elsevier Science. ISBN 9780123870414. OCLC 968996286.
- ^ Xuang, Z. Josh; Zeng, Hongkui (2013-07-10). "Sichqoncha ichidagi asab zanjirlariga genetik yondashuvlar". Nevrologiyani yillik sharhi. 36: 183–215. doi:10.1146 / annurev-neuro-062012-170307. PMID 23682658.
- ^ Enquist, L. V. (2002-12-01). "Markaziy asab tizimida psevdorabiya virusining o'ziga xos tarqalishini ekspluatatsiya qilish: patogenez va tutashuv izlari to'g'risida tushunchalar". Yuqumli kasalliklar jurnali. 186 (Qo'shimcha_2): S209 – S214. doi:10.1086/344278. ISSN 0022-1899. PMID 12424699.
- ^ Naumann, T .; Härtig, V.; Frotscher, M. (2000-11-15). "Ftor-Oltin bilan retrograd kuzatuv: ultrastrukturaviy darajada izni aniqlashning turli usullari va uzoq muddatli tadqiqotlarda orqada to'ldirilgan neyronlarning neyrodejenerativ o'zgarishlari". Nevrologiya usullari jurnali. 103 (1): 11–21. doi:10.1016 / s0165-0270 (00) 00292-2. ISSN 0165-0270. PMID 11074092.
Qo'shimcha o'qish
Retrograd kuzatuv quyidagi ko'plab misollarni o'z ichiga olgan ko'plab nevrologiya tadqiqotlarida keng qo'llanilgan:
- Song, Chenghui; Ehlers, Vanessa L.; Moyer, Jeyms R. (2015-09-30). "Infralimbik va Prelimbik kortekslarda Amigdala proektsion neyronlarining medial prefrontal korteks-basolateral kompleksining ichki qo'zg'aluvchanligini differentsial ravishda modulyatsiya qiladi". Neuroscience jurnali. 35 (39): 13511–13524. doi:10.1523 / JNEUROSCI.2329-15.2015. ISSN 0270-6474. PMC 4588614. PMID 26424895.
- Bacskai, Tmea; Rusznak, Zoltan; Paxinos, Jorj; Uotson, Charlz (2014-01-01). "Sichqonning orqa mushaklarini ta'minlovchi vosita neyronlarining muskulotopik tashkiloti: Fluoro-Gold retrograd kuzatuvi yordamida miqdoriy tadqiq". Miyaning tuzilishi va funktsiyasi. 219 (1): 303–321. doi:10.1007 / s00429-012-0501-7. hdl:20.500.11937/26565. ISSN 1863-2653. PMID 23288256.
- Shvarts, Lindsay A.; Miyamichi, Kazunari; Gao, Xiaojing J .; Beier, Kevin T.; Vaysburd, Brendon; DeLoach, Ketrin E .; Ren, Jing; Ibanes, Sendi; Malenka, Robert C. (2015). "Markaziy noradrenalin zanjirining kirish-chiqish tashkilotining virusli-genetik izlanishi". Tabiat. 524 (7563): 88–92. Bibcode:2015 Noyabr 524 ... 88S. doi:10.1038 / tabiat 14600. PMC 4587569. PMID 26131933.
- Ohara, Shinya; Sato, Sho; Tsutsui, Ken-Ichiro; Witter, Menno P.; Iijima, Toshio (2013-11-06). "Dorsal va Ventral Dentat Girusga multisinaptik kirishlarni tashkil etish: kalamushda quturgan virusli vektor bilan retrograd trans-sinaptik kuzatuv". PLOS ONE. 8 (11): e78928. Bibcode:2013PLoSO ... 878928O. doi:10.1371 / journal.pone.0078928. ISSN 1932-6203. PMC 3819259. PMID 24223172.
- DeNardo, Laura A; Berns, Dominik S; DeLoach, Ketrin; Luo, Liqun (2015). "Sichqoncha somatosensor va prefrontal korteksning trans-sinaptik kuzatuv bilan tekshirilishi". Tabiat nevrologiyasi. 18 (11): 1687–1697. doi:10.1038 / nn.4131. PMC 4624522. PMID 26457553.