Tuzlanish - Salting out

Tuzlanish (shuningdek, nomi bilan tanilgan yog'ingarchilik sho'ridan kelib chiqadi, tuzni fraksiyalash, hal qiluvchi qarshi kristallanish, yog'ingarchilik kristalizatsiyasi, yoki g'arq bo'lish)^[1] bu juda yuqori eritmadagi ba'zi molekulalarning pasaytirilgan eruvchanligidan foydalanadigan tozalash texnikasi ion kuchi. Tuzlanish odatda oqsillar yoki DNK kabi yirik biomolekulalarni cho'ktirish uchun ishlatiladi^[2]. Chunki tuz ma'lum bir protein uchun zarur bo'lgan konsentratsiya cho'kma tashqarida yechim oqsildan oqsilgacha farq qiladi, maqsadli oqsilni cho'ktirish uchun o'ziga xos tuz konsentratsiyasidan foydalanish mumkin. Ushbu jarayon oqsillarning suyultirilgan eritmalarini konsentratsiyalash uchun ham ishlatiladi. Dializ agar kerak bo'lsa, tuzni olib tashlash uchun ishlatilishi mumkin.

Printsip

Tuzli birikmalar suvli eritmalarda dissotsilanadi. Ushbu mulk tuzlash jarayonida foydalaniladi. Tuz konsentratsiyasi oshganda, suv molekulalarining bir qismini tuz ionlari jalb qiladi, bu oqsilning zaryadlangan qismi bilan ta'sir o'tkazish uchun mavjud bo'lgan suv molekulalarining sonini kamaytiradi.^[3]

Tuz kontsentratsiyasini oshirishga asoslangan texnikani tuzlash va tuzlash printsipi.

Lar bor hidrofob aminokislotalar va hidrofilik aminokislotalar yilda oqsil Suvli eritmada oqsil katlangandan so'ng hidrofob aminokislotalar odatda himoyalangan hidrofobik maydonlarni hosil qiladi, hidrofil aminokislotalar esa molekulalar bilan o'zaro ta'sir qiladi halollik va oqsillarni atrofdagi suv molekulalari bilan vodorod aloqalarini hosil qilishiga imkon bering. Agar oqsil sirtining etarli qismi hidrofilik bo'lsa, oqsil suvda eritilishi mumkin.

Eritmaga tuz qo'shilsa, erituvchi molekulalari va tuz ionlari o'rtasida tez-tez o'zaro ta'sir bo'ladi. Natijada oqsil va tuz ionlari erituvchi molekulalari bilan o'zaro ta'sirlashishda raqobatlashadi, natijada oqsil molekulalari bilan o'zaro ta'sirlashish uchun avvalgiga qaraganda kamroq erituvchi molekulalari mavjud. The oqsil va oqsillarning o'zaro ta'siri Shunday qilib, erituvchi va erigan o'zaro ta'sirlardan kuchliroq bo'ladi va oqsil molekulalari hosil bo'lib birikadi gidrofobik o'zaro ta'sirlar bir-birlari bilan.^[4] Berilgan erituvchida dissotsiatsiyadan so'ng tanlangan tuzdan manfiy zaryadlangan atomlar eritmada mavjud bo'lgan musbat zaryadlangan molekulalar bilan o'zaro ta'sirlashish uchun raqobatlasha boshlaydi. Xuddi shunday, musbat zaryadlangan kationlar erituvchining manfiy zaryadlangan molekulalari bilan o'zaro ta'sirlashish uchun raqobatlashadi. Ushbu jarayon tuzlash deb nomlanadi.

Sovunlar konsentrlangan tuz eritmasi bilan osonlikcha cho'kadi, tuz tarkibidagi metall ioni sovunni hosil qiluvchi yog 'kislotalari bilan reaksiyaga kirishadi va glitserol.

Ilova

Turli xil oqsillar turli xil aminokislotalarga ega bo'lgani uchun, turli xil oqsil molekulalari tuz eritmasining turli konsentratsiyalarida cho'kadi.

Keraksiz oqsillarni oqsilni tuz konsentratsiyasida turli konsentratsiyalarda eruvchanligi ma'lum bo'lgan vaqtgacha tuzlash orqali oqsil eritmasidan tozalash mumkin. filtrlash yoki santrifüj, tuz konsentratsiyasini kerakli oqsil erimaydigan darajaga o'zgartirish orqali kerakli oqsilni cho'ktirish mumkin.

Oqsillarni tozalashda sho'rlanishning bir kamligi shundaki, ma'lum bir proteinni cho'ktirishdan tashqari, ifloslantiruvchi moddalar ham cho'ktiriladi. Shunday qilib, qiziqroq bo'lgan oqsilni olish uchun ion almashinadigan xromatografiya kabi qo'shimcha tozalash usullari talab qilinishi mumkin.^[5]

Shuningdek qarang

Adabiyotlar

^ Genk, Ueyn (2010). "Antisolvent kristallanishidan maksimal darajada foydalaning". Kimyoviy ishlov berish. PutmanMedia.
^ Chakon-Kortes, D; Griffits, L (2020 yil 4-dekabr). "Umumiy qon namunalaridan genomik DNKni olish usullari: hozirgi istiqbollar". Amaliy tibbiyot uchun biorepository Science jurnali. 2014:2: 1–9.
^ Arakava, T; Timasheff, S (1984). "Divalentli kation tuzlarida oqsillarni tuzlash va tuzlash mexanizmi: gidratatsiya va tuzni bog'lash o'rtasidagi muvozanat". Biokimyo. Amerika kimyo jamiyati. 23: 5912–5923.
^ Novak, P; Havlichek, V (2016). "Oqsillarni ajratib olish va yog'ingarchiliklar". Proteomik profil va analitik kimyo. Elsevier. 51-62 betlar. ISBN 978-0-444-63688-1.
^ Duong-Ly, Krisna (2014 yil 25 mart). Ammoniy sulfat yog'inlari yordamida oqsillarni tuzlash. Enzimologiyadagi usullar. 541. 85-94 betlar. doi:10.1016 / B978-0-12-420119-4.00007-0. ISBN 9780124201194. PMID 24674064.

Fizik biokimyo, Devid Sheehan, Vili Blekuell (2009) p 285
Miller, S. A .; Deyks, D. D.; Poleskiy, H. F. (1988). "Odamning yadroli hujayralaridan DNK ajratib olish uchun oddiy tuzlash tartibi". Nuklein kislotalarni tadqiq qilish. 16 (3): 1215. doi:10.1093 / nar / 16.3.1215. PMC 334765. PMID 3344216.
C. Beldie Uchlik tizimdagi faollik koeffitsientlari: elektrolit bo'lmagan - suv - elektrolit, Revue Roum. Chim. 15, 221-228, 1970 yil

Tashqi havolalar

Qarorga qarshi kristallanishdan maksimal darajada foydalaning
Tuzlanish UC Devis ChemWiki-da

[1] Genk, Ueyn (2010). "Antisolvent kristallanishidan maksimal darajada foydalaning". Kimyoviy ishlov berish. PutmanMedia.

[2] Chakon-Kortes, D; Griffits, L (2020 yil 4-dekabr). "Umumiy qon namunalaridan genomik DNKni olish usullari: hozirgi istiqbollar". Amaliy tibbiyot uchun biorepository Science jurnali. 2014:2: 1–9.

[3] Arakava, T; Timasheff, S (1984). "Divalentli kation tuzlarida oqsillarni tuzlash va tuzlash mexanizmi: gidratatsiya va tuzni bog'lash o'rtasidagi muvozanat". Biokimyo. Amerika kimyo jamiyati. 23: 5912–5923.

[4] Novak, P; Havlichek, V (2016). "Oqsillarni ajratib olish va yog'ingarchiliklar". Proteomik profil va analitik kimyo. Elsevier. 51-62 betlar. ISBN 978-0-444-63688-1.

[5] Duong-Ly, Krisna (2014 yil 25 mart). Ammoniy sulfat yog'inlari yordamida oqsillarni tuzlash. Enzimologiyadagi usullar. 541. 85-94 betlar. doi:10.1016 / B978-0-12-420119-4.00007-0. ISBN 9780124201194. PMID 24674064.

[1]

[2]

[3]

[4]

[5]