Ikkilamchi syujet (kinetika) - Secondary plot (kinetics)

Yilda fermentlar kinetikasi, a ikkinchi darajali uchastka qo'shimcha kinetik konstantalarni topish uchun bir nechta Lineweaver-Burk uchastkalarining kesish yoki qiyalikdan foydalanadi.^[1][2]

Masalan, v ning to'plami [S] an dan egri chiziqli bo'lganda ferment ping-pong mexanizmi bilan (o'zgaruvchan substrat A, sobit substrat B) a ga chizilgan Lineweaver - Burk fitnasi, parallel chiziqlar to'plami ishlab chiqariladi.

Quyidagi Mayklis - Menten tenglamasi dastlabki reaktsiya tezligini bog'laydi v₀ uchun substrat konsentratsiyalar [A] va [B]:

${ displaystyle { begin {aligned} { frac {1} {v_ {0}}} & = { frac {K_ {M} ^ {A}} {v _ { max} {[} A {]} }} + { frac {K_ {M} ^ {B}} {v _ { max} {[} B {]}}} + { frac {1} {v _ { max}}} end {hizalanmış }}}$

Ushbu tenglamaning y kesilishi quyidagilarga teng:

${ displaystyle { begin {aligned} { mbox {y-intercept}} = { frac {K_ {M} ^ {B}} {v _ { max} {[} B {]}}} + { frac {1} {v _ { max}}} end {aligned}}}$

Y tutish B substratning bir necha xil kontsentratsiyasida (va har xil substrat A) aniqlanadi. Keyin Y tutish qiymatlari 1 / [B] ga nisbatan chizilib, B substrat uchun Michaelis doimiyligini aniqlaydi, ${ displaystyle K_ {M} ^ {B}}$, o'ngdagi rasmda ko'rsatilgandek.^[3] Nishab tengdir ${ displaystyle K_ {M} ^ {B}}$ tomonidan bo'lingan ${ displaystyle v _ { max}}$ va kesish 1 ga teng ${ displaystyle v _ { max}}$.

Horseradish Peroxidase va. Ferment tizimining ikkilamchi uchastkasi o-Fenilendiamin (ikkinchi substrat sifatida vodorod peroksid bilan)

Tormozlanish ishlarida ikkilamchi syujet

Ikkilamchi uchastkadan ma'lum bir inhbtsiya konstantasi K ni topish uchun ham foydalanish mumkin_Men.

Raqobatbardosh uchun ferment inhibitori, aniq Mayklis doimiysi quyidagilarga teng:

${ displaystyle { begin {aligned} { mbox {apparent}} K_ {m} = K_ {m} times left (1 + { frac {[I]} {K_ {I}}} right) end {hizalangan}}}$

Lineweaver-Burk uchastkasining qiyaligi quyidagicha:

${ displaystyle { begin {aligned} { mbox {slope}} = { frac {K_ {m}} {v _ { max}}} times left (1 + { frac {[I]} { K_ {I}}} o'ng) end {hizalangan}}}$

Agar har xil inhibitor kontsentratsiyasi [I] ning bir nechta Lineweaver-Burk uchastkalaridan qiyalik qiymatlaridan iborat ikkinchi darajali uchastkani yaratsa, raqobatbardosh inhbition konstantasi topilishi mumkin. Ikkilamchi uchastkaning kesma bilan bo'linishi qiyaligi 1 / K ga teng_Men. Ushbu usul K ni topishga imkon beradi_Men doimiy, hatto Mayklis doimiy va v_maksimal qiymatlari ma'lum emas.

Adabiyotlar