DH5-Alfa hujayrasi - DH5-Alpha Cell - Wikipedia

DH5-Alpha hujayralari bor E.coli maksimal darajaga ko'tarish uchun ishlab chiqarilgan hujayralar transformatsiya samaradorlik. Ular uchta mutatsiya bilan belgilanadi[1] plazmid kiritishga yordam beradigan recA1, endA1 va imkon beradigan lacZΔM15 ko'k oq skrining. Hujayralar vakolatli va ko'pincha bilan ishlatiladi kaltsiy xloridning o'zgarishi kerakli plazmidni kiritish uchun. To'rt transformatsiya usuli va oltita bakteriya shtammini o'rganish shuni ko'rsatdiki, eng samarali bo'lgan DH5 shtammidir Xanaxon usul[2]

Mutatsiyalar

  • RecA1 mutatsiyasi - bu retsA polipeptidining glitsin 160ini aspartik kislota qoldig'i bilan almashtiradigan bir nuqtali mutatsiya.[3] faoliyatini o'chirib qo'yish uchun rekombinazlar va faolsizlantiring gomologik rekombinatsiya.
  • EndA1 mutatsiyasi hujayraga kiritilgan plazmidni parchalanishiga yo'l qo'ymaslik uchun hujayra ichidagi endonukleazani inaktiv qiladi.

Adabiyotlar

  1. ^ "Kuchlanish - DH5a". cgsc2.biology.yale.edu. Olingan 2017-05-23.
  2. ^ Chan, Veng-Tat; Verma, Chandra S.; Leyn, Devid P.; Gan, Samuel Ken-En (2013-12-12). "Escherichia coli konversiyasiga ta'sir qiluvchi usullar va omillarni taqqoslash va optimallashtirish". Bioscience hisobotlari. 33 (6). doi:10.1042 / BSR20130098. ISSN  0144-8463. PMC  3860579. PMID  24229075.
  3. ^ Bryant, Floyd (1987 yil 9-noyabr). "DNKga bog'liq bo'lgan ATPaza faolligini saqlaydigan rekombinaza etishmovchiligi bo'lgan mutant recA oqsilini qurish" (PDF). Biologik kimyo jurnali.