P19 xujayrasi - P19 cell - Wikipedia

Sichqoncha P19 embrion karsinoma hujayralari hujayradan hujayra bilan aloqa qilishda beta-katenin o'rnini ko'rsatish uchun immunitetga bo'yalgan.

P19 hujayralari embrionaldir karsinoma hujayra chizig'i embriondan olingan teratokarsinoma sichqonlarda. Hujayra chizig'i pluripotent va barcha uchta jinsiy qatlamlarning hujayra turlariga ajralib turishi mumkin. Bundan tashqari, u indüklenebilen eng xarakterli bo'lgan embrional karsinoma (EC) hujayra liniyasidir yurak mushaklari hujayralar va neyronal hujayralarni turli xil o'ziga xos davolash usullari. Darhaqiqat, yig'ilgan P19 hujayralarini ta'sir qilish dimetil sulfoksid (DMSO) yurak va skelet mushaklari. Bundan tashqari, P19 hujayralarini ta'sir qilish retinoik kislota (RA) ularni neyron hujayralariga ajratishi mumkin.[1]

P19 hujayra chizig'ining kelib chiqishi

Saraton hujayralari odamlarda bemorning o'limiga olib kelishi mumkin, agar agressiv saraton hujayrasi o'sib, metastaz qilsa. Biroq, tadqiqotchilar ushbu hujayralardan aniqroq davolash usullarini topish uchun saraton hujayralarining rivojlanishini o'rganish uchun foydalanadilar. Rivojlanayotgan biologlar uchun, embrion karsinomasi, teratokarsinomadan olingan, rivojlanishni o'rganish uchun yaxshi ob'ekt. 1982 yilda McBurney va Rogers 7,5 kunlik sichqon embrionini transplantatsiya qildilar moyak o'smaning o'sishini qo'zg'atish uchun. Differentsiyalanmagan o'z ichiga olgan hujayra madaniyati ildiz hujayralari dan ajratilgan asosiy o'sma ega bo'lgan euploid karyotip. Ushbu ildiz hujayralari embrion karsinomasi P19 hujayralari deb nomlangan.[2] Ushbu hosil bo'lgan P19 hujayralari oziqlantiruvchi hujayralarsiz tez o'sdi va ularni saqlash oson edi. Bundan tashqari, P19 hujayralarining ko'p quvvatliligi keyinchalik hujayralarga in'ektsiya yo'li bilan tasdiqlangan blastotsistlar sichqonchaning yana bir turi. Tadqiqotchilar uchalasining to'qimalari borligini aniqladilar germ qatlamlari sichqonchani qabul qiluvchida o'sadi.[3] Doimiy tadqiqotlar asosida ular P19S18, P19D3, P19RAC65 va P19C16: asl P19 hujayralaridan pastki tipdagi hujayra chiziqlarini olishdi. Ushbu kichik hujayra chiziqlari orasidagi farq, navbati bilan retinoik kislota yoki DMSO bilan davolashga javoban neyron hujayralariga yoki mushak hujayralariga ajratish qobiliyatidir.[3][4][5]Yaqinda turli xil tadqiqotlar dastlab P19 hujayralarining differentsiyalangan hujayralaridan hosil bo'lgan hujayra chiziqlarini hosil qiladi. P19 hujayralarining pluripotensiyasi tufayli yangi hosil bo'lgan hujayra chiziqlari bo'lishi mumkin ektoderm, mezoderma va endoderm o'xshash hujayralar.[6]

P19 hujayralarining differentsiatsiyasi

P19 hujayralarini saqlash mumkin eksponent o'sish barqaror xromosoma tarkibi tufayli. Embrion karsinomasi barcha uchta jinsiy qatlam hujayralariga ajralib turishi mumkinligi sababli, P19 hujayralari ham o'sha ektoderma, mezodermaga va endodermaga o'xshash hujayralarga ajralib turishi mumkin. Embrional karsinoma hujayralari yuqori zichlikda o'stirilganda, ular boshlanadi farqlash.[7] Hujayralarni embrional tanaga to'plash orqali EC hujayralari ham differentsiatsiyani qayta ishlashlari mumkin.[8] P19 hujayralarida toksik bo'lmagan konsentratsiyali dorilarni agregatsiyaga qo'shilishi embrion tanasi hujayralar qo'shilgan dori-darmonga qarab P19 hujayralarini aniq hujayralar qatoriga ajratishini keltirib chiqarishi mumkin.[1] Ikkita eng keng tarqalgan va samarali dorilar bu retinoik kislota (RA) va dimetil sulfoksid (DMSO). Tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, ma'lum bir RA kontsentratsiyasi P19 hujayralarini neyron hujayralariga, shu jumladan neyronlarga ajratish uchun turtki berishi mumkin glial hujayralar,[9] 0,5% - 1% DMSO P19 hujayralarini yurak yoki skelet mushak hujayralariga ajratishga olib keldi. RA davolash usulida neyronlar, astrogliya va fibroblastlar birlashgandan keyin aniqlanishi mumkin. Differentsiyalangan hujayralar ham mavjud xolin atsetiltransferaza va atsetil xolinesteraza faoliyati.[10] DMSO bilan davolashda yurak mushak hujayralari 5 kun ta'sirlangandan keyin rivojlanib, skelet mushak hujayralari 8 kun ta'sirlangandan keyin paydo bo'ldi. Ushbu tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, giyohvand moddalarga ta'sir qilish ko'p miqdordagi P19 hujayralarni hujayralarning turli qatlamlariga ajralib chiqishiga olib keladi. Retinoik kislota yoki DMSO kontsentratsiyasi hujayralar uchun toksik bo'lmaganligi sababli, dori-darmonga xos differentsiatsiya hujayralar selektsiyasi emas induksiyasi bilan bog'liq. Preparatga xos differentsiatsiya mexanizmini o'rganish uchun P19 hujayralarining mutantlari hosil bo'lgan.[10] Bundan tashqari, bilan bog'liq signalizatsiya yo'llari neyrogenez va miyogenez o'qish orqali ham tekshirilgan gen ekspressioni yoki P19 hujayralarining mutantlarini hosil qiladi.

P19 hujayralaridagi neyrogenez.

Differentsiyalanmagan P19 hujayralarini retinoik kislota bilan davolash, ularni neyron hujayralarga aylantirishi mumkin. 1 mk dan 3 mkm gacha bo'lgan RA dozalarini qo'llash eng ko'p hujayra turi sifatida neyronlarni hosil qilishi mumkin.[4]Ushbu davolash ostida neyronlar olti kundan to'qqiz kungacha eng yuqori populyatsiyaga erishdilar. Kabi bir nechta neyronal belgilar neyrofilament oqsillar, HNK-1 antigeni va qoqshol toksinini bog'lash joylari shu kunlarda eng yuqori darajada namoyon bo'ladi.[11]Olti-to'qqiz kunlik davolanishdan so'ng, ehtimol neyron bo'lmagan hujayralarning ko'payishi tufayli nisbiy neyronlar soni kamayadi. 10 kunlik ta'sirdan so'ng astroglial hujayralar yordamida aniqlash mumkin glial fibrillyar kislotali oqsil Glial hujayralarning o'ziga xos belgisi bo'lgan (GFAP). Neyronlardan tashqari astrotsitlar, P19 hujayralari ham farqlanishi mumkin oligodendrotsitlar aniq markerlar yordamida aniqlanishi mumkin, miyelin bilan bog'liq glikoprotein va 2 ', 3'-tsiklik-nukleotid 3'-fosfodiesteraza. Bundan tashqari, oligodendrotsitlar ham rivojlanib, ularga ko'chib o'tdi tolalar to'plamlari sichqonlarda RA ta'sirida hujayralar ko'chirilganda miyalar.[12]
Retinoik kislota nafaqat P19 hujayralarini, balki boshqa hujayralarni ham chaqirishi mumkin avlod hujayralari yoki embrional ildiz hujayralari farqlash uchun. Retinoik kislota bilan davolashdan keyingi hujayralar zudlik bilan neyronal marker genlarini ifoda eta olmaganligi sababli, RA uyali differentsiatsiyani qayta ishlashga kirishishi kerak. Ko'pgina tadqiqotlar P19 hujayralarini RA tomonidan ishlab chiqarilgan mexanizmlarni, shu jumladan ishlab chiqarishni o'rganish uchun ishlatgan mutant allel ning retinoik kislota retseptorlari genlar va retseptorlari genlarining ekspressionini o'rganish, Hox genlari va retinolni bog'laydigan oqsillar RAga ta'sir qilish paytida.[13][14]

Ushbu tadqiqotlarning barchasi P19 xujayrasi yaxshi ekanligini ko'rsatadi in vitro ma'lum bir uyali yo'lga xalaqit beradigan dorilar mexanizmini o'rganish uchun model tizim. Bundan tashqari, P19 hujayrasida RA bilan bog'liq neyrogenez qobiliyatidan foydalangan holda, ko'plab tadqiqotchilar neyro- yoki gliogenezning in vitro differentsiatsiya mexanizmlarini aniqlashga kirishdilar. Bir nechta tegishli yo'llar yoki shu jumladan Wnt / b-katenin yo'llari, Notch yo'l va kirpi yo'li gen ekspressioni yoki generatsiya yordamida tekshiriladi allellar tegishli genlar uchun.[15][16][17]

P19 hujayra chizig'idagi miyogenez

Retinoik kislota bilan bir xil, DMSO tomonidan indüklenen differentsiatsiya P19 hujayralariga xos emas. Shuningdek, u qo'zg'atishi mumkin neyroblastoma hujayralar, o'pka saratoni hujayralar va sichqonchaning ES hujayralari.[18][19][20] 0,5-1% DMSO kontsentratsiyasida P19 hujayralari mezodermal va endodermal hujayra turlarini yig'ish va qayta ishlashga sabab bo'ldi.[1][10][21]
Birlashish va differentsiatsiya paytida yuzaga keladigan uyali mexanizm hali ham to'liq o'rganilmagan. Biroq, ba'zi tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki uyali aloqa mushaklarning differentsiatsiyasida P19 hujayralarida muhim rol o'ynaydi, bu mushaklarning differentsiatsiyasini qayta ishlash uchun avval hujayralarni nima uchun to'plash kerakligini tushuntirishi mumkin.[6]
P19 hujayralarida miyogenez mexanizmini aniqlash uchun yurakka xos bo'lgan bir nechta narsa transkripsiya omillari shu jumladan GATA-4, MEF2c, Msx-1, Nkx2.5, MHox, Msx-2 va MLP differentsiatsiya paytida o'zgarishi aniqlandi.[6] Hisobotlar shuni ko'rsatdiki, GATA-4, NKx2.5 va MEF2c barchasi DMSO induksiyasidan keyin yangilangan.[22][23] So'nggi yillarda yurakning differentsiatsiyasi va miogenez mexanizmini o'rganishda P19 hujayralari ham ishlatilgan. Asosiy ta'sirlangan signalizatsiya yo'li, suyak morfogenetik oqsillari (BMPs) yo'li P19 hujayralarida eng kuchli o'rganilgan signalizatsiya hisoblanadi. BMP antagonistini haddan tashqari oshirib yuboradigan P19CL6noggin hujayra chizig'ini yaratish orqali noggin, ular mutant hujayralari farq qilmaganligini aniqladilar kardiyomiyotsitlar 1% DMSO bilan davolashda BMPlar ushbu tizimda kardiyomiyotsitlar differentsiatsiyasi uchun ajralmas ekanligini ko'rsatdi. Shuningdek, ular TAK1, Nkx-2.5 va GATA-4 ning muhimligini ko'rsatadigan dalillarni taqdim etdilar kardiogen BMP signalizatsiya yo'li.[24]

Kelajakdagi yo'nalishlar

P19 hujayralari in vitro neyron hujayralari va mushak hujayralarining qimmatli shakllanishini ta'minlaydi. P19 hujayralarini parvarish qilish oson va boshqa embrional ildiz hujayralari bilan solishtirganda, ular in vitro rivojlanish tadqiqotlarini o'tkazish uchun qulay modeldir. Ushbu hujayra chizig'ini ma'lum genlarni ekspresiya qilish yoki nokaut qilish uchun manipulyatsiya qilish usullari signalizatsiya yo'llarini, funktsional jihatlarini batafsil o'rganish va miyogenez va neyrogenezning oqsil ekspresiyasini tartibga solish imkonini beradi. Kengaytirilgan tadqiqotlar keyingi bosqichlarini ham yoritishi mumkin yurak yoki miya rivojlanish va etuklik.

Adabiyotlar

  1. ^ a b v McBurney, MW; Rogers, BJ (fevral, 1982). "Erkaklarning embrion karsinom hujayralarini ajratish va ularning xromosomalarini ko'paytirish naqshlari". Rivojlanish biologiyasi. 89 (2): 503–8. doi:10.1016/0012-1606(82)90338-4. PMID  7056443.
  2. ^ McBurney, MW (1993). "P19 embrion karsinoma hujayralari". Int J Dev Biol. 37 (1): 135–140. PMID  8507558.
  3. ^ a b Rossant, J; McBurney, MW (1982 yil avgust). "Blastotsist in'ektsiyasidan so'ng euploid erkak teratokarsinoma hujayrasi rivojlanishining potentsiali". Embriologiya va eksperimental morfologiya jurnali. 70: 99–112. PMID  7142904.
  4. ^ a b Fannestok, M; Koshland DE, Jr (Fevral 1979). "Salmonella typhimuriumda galaktoza taksilarining retseptorlarini boshqarish". Bakteriologiya jurnali. 137 (2): 758–63. PMC  218354. PMID  370099.
  5. ^ Kreyin, BL; Rupert, CS (fevral 1979). "Escherichia coli-da replikatsiya va dezoksiribonuklein kislota sintezining boshlanishiga yaqin bo'lgan dezoksiribonuklein kislota-membrana o'zaro ta'siri". Bakteriologiya jurnali. 137 (2): 740–5. PMC  218351. PMID  370098.
  6. ^ a b v van der Heyden, MA; Defize, LH (2003-05-01). "Yigirma bir yillik P19 hujayralari: embrion karsinoma hujayralari liniyasi bizga kardiyomiyotsitlar differentsiatsiyasi to'g'risida nimani o'rgatdi". Yurak-qon tomir tadqiqotlari. 58 (2): 292–302. doi:10.1016 / S0008-6363 (02) 00771-X. PMID  12757864.
  7. ^ McBurney, MW (noyabr 1976). "Teratokarsinoma hujayralarining klon chiziqlari in vitro: differentsiatsiyasi va sitogenetik xususiyatlari". Uyali fiziologiya jurnali. 89 (3): 441–55. doi:10.1002 / jcp.1040890310. PMID  988033.
  8. ^ Martin, GR; Evans MJ (1975). "In vitro embrion tanasi hosil bo'lishidan keyin klonal teratokarsinoma ildiz hujayralarining ko'p farqlanishi". Hujayra. 6 (4): 467–74. doi:10.1016/0092-8674(75)90035-5.
  9. ^ Edvards, MK; Xarris, JF; McBurney, MW (1983 yil dekabr). "Embrion karsinoma hujayrasi chizig'ida mushaklarning induksiyasi". Molekulyar va uyali biologiya. 3 (12): 2280–6. doi:10.1128 / mcb.3.12.2280. PMC  370099. PMID  6656767.
  10. ^ a b v Jons-Villeneuve, EM; Rudnicki, MA; Xarris, JF; McBurney, MW (1983 yil dekabr). "Embrion karsinom hujayralarining retinoik kislotadan kelib chiqqan asabiy differentsiatsiyasi". Molekulyar va uyali biologiya. 3 (12): 2271–9. doi:10.1128 / mcb.3.12.2271. PMC  370098. PMID  6656766.
  11. ^ McBurney, MW; Reyl, KR; Ally, AI; Nasipuri, S; Bell, JC; Kreyg, J (1988 yil mart). "Hujayra madaniyatida embrion karsinomasidan kelib chiqqan neyronlarning differentsiatsiyasi va pishishi". Neuroscience jurnali. 8 (3): 1063–73. doi:10.1523 / JNEUROSCI.08-03-01063.1988. PMID  2894413.
  12. ^ Steynlar, VA; Kreyg, J; Reyl, K; McBurney, MW (1996 yil aprel). "Retinoik kislota bilan muomala qilingan P19 embrion karsinoma hujayralari miyelinatsiyaga qodir oligodendrotsitlarga ajralib chiqadi". Nevrologiya. 71 (3): 845–53. doi:10.1016/0306-4522(95)00494-7. PMID  8867053.
  13. ^ Pratt, MA; Kralova, J; McBurney, MW (1990 yil dekabr). "Retinoik kislota javob bermaydigan embrion karsinom hujayrasida alfa retinoik kislota retseptorlari genining dominant salbiy mutatsiyasi". Molekulyar va uyali biologiya. 10 (12): 6445–53. doi:10.1128 / mcb.10.12.6445. PMC  362921. PMID  2174108.
  14. ^ Chen, Y; Riz, DH (oktyabr 2011). "Sichqoncha pluripotentli P19 hujayralaridagi retinol signalizatsiyasi yo'li" (PDF). Uyali biokimyo jurnali. 112 (10): 2865–72. doi:10.1002 / jcb.23200. PMID  21618588.
  15. ^ Nye, JS; Kopan, R; Axel, R (1994 yil sentyabr). "Faollashgan Notch sutemizuvchilar hujayralarida neyrogenez va miogenezni bostiradi, ammo gliogenezni emas". Rivojlanish. 120 (9): 2421–30. PMID  7956822.
  16. ^ Hamada-Kanazava, M; Ishikava, K; Nomoto, K; Uozumi, T; Kavay, Y; Naraxara, M; Miyake, M (2004-02-27). "Sox6 haddan tashqari ekspressioni retinoik kislota bo'lmaganida hujayra birikmasini va P19 embrion karsinoma hujayralarining neyronal differentsiatsiyasini keltirib chiqaradi". FEBS xatlari. 560 (1–3): 192–8. doi:10.1016 / S0014-5793 (04) 00086-9. PMID  14988021.
  17. ^ Tan, Y; Xie, Z; Ding, M; Vang, Z; Yu, Q; Men, L; Chju, H; Xuang, X; Yu, L; Men, X; Chen, Y (sentyabr 2010). "Pluripotent P19 embrion karsinoma hujayralarida FoxA1 transkripsiyasi omilining darajasining ortishi asabiy differentsiatsiyani rag'batlantiradi". Ildiz hujayralari va rivojlanishi. 19 (9): 1365–74. doi:10.1089 / scd.2009.0386. PMID  19916800.
  18. ^ Lako, M; Lindsay, S; Linkoln, J; Keyns, Bosh vazir; Armstrong, L; Teshik, N (2001). "In vitro murin embrionining ildiz hujayralarini differentsiatsiyasi paytida Wnt gen ekspressionining xarakteristikasi: Gematopoetik differentsiatsiyani kuchaytirishda Wnt3 ning roli". Rivojlanish mexanizmlari. 103 (1–2): 49–59. doi:10.1016 / S0925-4773 (01) 00331-8. PMID  11335111.
  19. ^ Tralka, TS; Rabson, AS (1976 yil dekabr). "Dimetil sulfoksid bilan davolangan odamning o'pka saraton hujayralari madaniyatida siliya shakllanishi". Milliy saraton instituti jurnali. 57 (6): 1383–8. doi:10.1093 / jnci / 57.6.1383. PMID  1003564.
  20. ^ Littauer, UZ; Palfri, C; Kimhi, Y; Spector, I (1978 yil may). "Sichqoncha neyroblastom hujayralarida differentsiatsiyani induktsiya qilish". Milliy saraton instituti monografiyasi (48): 333–7. PMID  748753.
  21. ^ McBurney, MW; Jons-Villeneuve, EM; Edvards, MK; Anderson, PJ (1982-09-09). "Madan qilingan embrion karsinomasi hujayralari chizig'ida mushak va neyronlarning farqlanishini boshqarish". Tabiat. 299 (5879): 165–7. Bibcode:1982 yil natur.299..165M. doi:10.1038 / 299165a0. PMID  7110336. 2 kun ta'sirlangandan so'ng endodermaga o'xshash hujayralar paydo bo'lib, ibtidoiy ekstraembrional endodermaga o'xshaydi. 6 kunlik ta'sirdan so'ng, yurak mushaklari agregatlar ichki qismida paydo bo'ldi. Yurak mushaklari hujayralarining tarkibi hujayralarning 25 foizini tashkil etdi. 10 kunlik ta'sirdan so'ng, embrion tanasi atrofida skelet mushak hujayralari paydo bo'ldi.
  22. ^ Skerjanc, IS; Petropulos, H; Ridjyuey, AG; Wilton, S (1998-12-25). "Miotsitni kuchaytiruvchi omil 2C va Nkx2-5 bir-birining ekspressionini yuqori darajada tartibga soladi va P19 hujayralarida kardiyomiyogenezni boshlaydi". Biologik kimyo jurnali. 273 (52): 34904–10. doi:10.1074 / jbc.273.52.34904. PMID  9857019.
  23. ^ Grepin, C; Nemer, G; Nemer, M (iyun 1997). "GATA-4 transkripsiyasi omilini haddan tashqari oshirib yuboradigan embrional ildiz hujayralarida rivojlangan kardiogenez". Rivojlanish. 124 (12): 2387–95. PMID  9199365.
  24. ^ Monzen, K; Shiojima, men; Xiroi, Y; Kudoh, S; Oka, T; Takimoto, E; Xayashi, D; Xosoda, T; Xabara-Ohkubo, A; Nakaoka, T; Fujita, T; Yazaki, Y; Komuro, I (1999 yil oktyabr). "Suyak morfogenetik oqsillari mitogen bilan faollashtirilgan protein kinaz kinaz kinaz kinaz TAK1 va yurak transkripsiyasi omillari Csx / Nkx-2.5 va GATA-4 orqali kardiyomiyotsitlar differentsiatsiyasini keltirib chiqaradi". Molekulyar va uyali biologiya. 19 (10): 7096–105. doi:10.1128 / mcb.19.10.7096. PMC  84704. PMID  10490646.

Tashqi havolalar