Dilim tayyorlash - Slice preparation

The tilim tayyorlash yoki miya bo'lagi a laboratoriya texnikasi yilda elektrofiziologiya bu o'rganishga imkon beradi sinaps yoki miyaning qolgan qismidan ajratilgan holda, boshqariladigan fiziologik sharoitlarda asab zanjiri. Miya to'qimalari dastlab to'qima dilimleyicisi orqali kesiladi, so'ngra ichiga tushiriladi sun'iy miya omurilik suyuqligi (aCSF) stimulyatsiya va / yoki yozib olish uchun. Texnika kattaroq narsalarga imkon beradi tajriba nazorati, miyaning qolgan qismining ta'sirini yo'q qilish orqali elektron qiziqish, orqali fiziologik sharoitlarni ehtiyotkorlik bilan boshqarish perfuziya orqali substratlar inkubatsiya suyuqligi, aniq manipulyatsiyaga neyrotransmitter perfuziya orqali faoliyat agonistlar va antagonistlar. Biroq, nazoratning kuchayishi natijalarni butun asab tizimiga tatbiq etish qulayligining pasayishi bilan birga keladi.

Sichqoncha miyasi sxematik ravishda tilim

Foyda va cheklovlar

Sutemizuvchilarning CNS faolligini tekshirishda, in vivo jonli o'rganish bilan taqqoslaganda, tilim tayyorlashning bir qancha afzalliklari va kamchiliklari bor: tilim tayyorlash ham tezroq, ham arzonroq. jonli ravishda tayyorlash va talab qilmaydi behushlik dastlabki qurbonlikdan tashqari. Miya to'qimasini tanadan olib tashlash yurak urishining mexanik ta'sirini olib tashlaydi va nafas olish, bu uzaytirilishiga imkon beradi hujayra ichidagi yozuv. Namunaning fiziologik holati, masalan, kislorod va karbonat angidrid darajasi yoki pH ning hujayradan tashqari suyuqlik ehtiyotkorlik bilan sozlanishi va saqlanishi mumkin. Mikroskop ostida tilim bilan ishlash, shuningdek, yopiq in Vivo jonli tizimda amalga oshirib bo'lmaydigan yozuv elektrodini ehtiyotkorlik bilan joylashtirishga imkon beradi. Miya to'qimasini olib tashlash, yo'qligini anglatadi qon-miya to'sig'i, bu dorilar, neyrotransmitterlar yoki ularga ruxsat beradi modulyatorlar, yoki ionlar asab to'qimalarida tarqalishi kerak. Va nihoyat, miya tilimida ajratilgan sxema sxemaning soddalashtirilgan modelini ifodalaydi joyida, u hujayra madaniyatida yo'qolgan strukturaviy aloqalarni saqlaydi yoki bir jinsli to'qima.

Biroq, tilim tayyorlashning ba'zi kamchiliklari ham bor. Shubhasiz, ajratilgan tilimga odatdagidek etishmayapti kirish va chiqish aloqalari butun miyada mavjud. Bundan tashqari, dilimleme jarayoni o'zi to'qimalarni buzishi mumkin. Dilimlash jarayonidagi asoratlarni minimallashtirish uchun tirik to'qima hujayralari miqdorini maksimal darajaga ko'tarish uchun ishlatiladigan tebranuvchi mikrotomaning turi - Compresstome singari murakkab to'qima kesuvchi vositadan foydalanish mumkin. ^[1]. Bundan tashqari, miyaning kesilishi qismning yuqori va pastki qismlariga zarar etkazishi mumkin, ammo bundan tashqari, jarayon boshni kesish va tilimni eritmaga joylashtirishdan oldin miyani ekstraktsiyasi hali tushunilmagan to'qimalarga ta'sir qilishi mumkin. Yozib olish paytida to'qima ham "qariydi", buzilmagan hayvonga qaraganda tezroq pasayadi. Va nihoyat, cho'milish eritmasining sun'iy tarkibi kerakli birikmalarning mavjudligi va nisbiy konsentratsiyasi mavjud bo'lmasligini anglatadi.

Adabiyotlar

• Schurr, Avital, Elektrofiziologiyada miya tilimini tayyorlash, Kopf tashuvchisi, Vol 15