Insoniylashtirilgan antikor - Humanized antibody

Insoniylashtirilgan antikorlar bor antikorlar odam bo'lmagan turlardan kimning oqsillar ketma-ketligi odamlarda tabiiy ravishda ishlab chiqarilgan antikor variantlariga o'xshashligini oshirish uchun o'zgartirilgan.[1][2] Odatda "insonparvarlik" jarayoni qo'llaniladi monoklonal antikorlar odamlarga yuborish uchun ishlab chiqilgan (masalan, saratonga qarshi dorilar sifatida ishlab chiqarilgan antikorlar). Muayyan antikorni yaratish jarayoni o'z ichiga olgan bo'lsa, insonparvarlashtirish zarur bo'lishi mumkin avlod insonga tegishli bo'lmagan immunitet tizimida (masalan, sichqonlarda). Shu tarzda ishlab chiqarilgan antikorlarning oqsillar ketma-ketligi qisman ajralib turadi gomologik odamlarda tabiiy ravishda yuzaga keladigan antikorlar va shuning uchun potentsialdir immunogen bemorlarga yuborilganda (shuningdek qarang.) Sichqonga qarshi odam antitelasi ). Lar bor boshqa turdagi antikorlar ishlab chiqilgan. The Xalqaro nomuvofiq nomlar gumanizatsiya qilingan antikorlarning oxiri tugaydi -zumab, kabi omalizumab (qarang Monoklonal antikorlarning nomlanishi ).

Insoniylashtirilgan antikorlar ajralib turadi kimyoviy antikorlar. Ikkinchisida oqsillar ketma-ketligi odam antikorlariga o'xshashroq bo'ladi, ammo odam bo'lmagan oqsillarning katta qismini o'z ichiga oladi.

Rekombinat DNKdan insonparvarlashtirish jarayonida foydalanish

Insonparvarlashtirish jarayoni monoklonal antikorlarni ishlab chiqarish yordamida amalga oshirilishi mumkinligidan foydalanadi rekombinant DNK yaratmoq konstruktsiyalar[3] qodir ifoda yilda sutemizuvchi hujayra madaniyati. Ya'ni, antikorlarni ishlab chiqarishga qodir bo'lgan gen segmentlari ajratilgan va klonlangan ichida o'stirilishi mumkin bo'lgan hujayralarga bioreaktor bunday antikor oqsillar klonlangan genlarning DNKsidan hosil bo'lishi mumkin ommaviy ravishda. Rekombinant DNKni o'z ichiga olgan qadam, ekspresiya qilingan antikorning oqsillar ketma-ketligini o'zgartirish uchun osonlikcha ishlatilishi mumkin bo'lgan aralashuv nuqtasini beradi. Insonparvarlik jarayonida erishilgan antikorlar tuzilishidagi o'zgarishlar DNK darajasidagi metodlar yordamida amalga oshiriladi. Inson terapiyasiga mo'ljallangan antikorlarni olishning barcha usullari ham insonparvarlashtirish bosqichini talab qilmaydi (masalan.) faj displeyi ), ammo aslida barchasi antikor molekulasining qismlarini "kiritish" yoki "almashtirish" ga imkon beradigan texnikaga bog'liq.

"Ximerik antikor" dan farq

Eskizlari kimerik (yuqori o'ngda), gumanizatsiya qilingan (pastki chapda) va ximerik / gumanizatsiyalangan (pastki o'rta) monoklonal antikorlar. Inson qismlari jigarrang, insonga tegishli bo'lmagan qismlar ko'k rangda ko'rsatilgan.

Gumanizatsiya odatda sichqon-odam yaratilishidan farq qiladi antikor ximerasi. Shunday qilib, odatda antikor ximerasini yaratish odamga o'xshash antikorga erishish uchun qabul qilingan bo'lsa-da (sichqoncha antikorining doimiy mintaqasini odamnikiga almashtirish bilan) ushbu turdagi oddiy ximeralar odatda insonparvar deb nomlanmaydi. Aksincha, gumanizatsiya qilingan antikorning oqsillar ketma-ketligi, odamning ba'zi bir kelib chiqishiga qaramay, inson variantiga o'xshashdir. bir-birini to'ldiruvchi mintaqa (CDR) antikorning maqsad antijeni bilan bog'lanish qobiliyatidan mas'ul bo'lgan segmentlar.

Kimerik antikor nomlari tarkibiga a kiradi -xi- ildiz. Inson terapiyasi uchun tasdiqlangan ximerik antikorlarga misollar kiradi abciximab (ReoPro), basiliximab (Simulect), cetuximab (Erbitux), infliximab (Remicade) va rituximab (Mabtera). Ayni paytda klinik tadkikotlarda ximerikaning bir nechta namunalari mavjud (masalan, bavituximab, sortable ga qarang ro'yxat qo'shimcha misollar uchun).

Kimerik vositalar orqali insonparvarlashtirish

Biroq, insonparvarlashtirish jarayoni dastlabki bosqichda sichqon-odam ximerasini yaratishni o'z ichiga olishi mumkin (sichqonchaning o'zgaruvchan mintaqasi odamning doimiy mintaqasiga qo'shilgan). Keyinchalik, ximera molekulaning o'zgaruvchan mintaqasida aminokislotalar ketma-ketligini tanlab o'zgartirish orqali yanada insoniylashtirilishi mumkin. Antikor dastlab ishlab chiqilgan o'ziga xosligini saqlab qolish uchun jarayon "tanlangan" bo'lishi kerak. Ya'ni, o'zgaruvchan mintaqaning CDR qismlari antikorning mo'ljallangan maqsadga bog'lanish qobiliyati uchun juda zarur bo'lganligi sababli, ushbu qismlardagi aminokislotalarni rivojlanish maqsadiga putur etkazish xavfisiz o'zgartirish mumkin emas. CDR segmentlaridan tashqari, o'zgaruvchan mintaqalarning odamlardan farq qiladigan qismlarini tegishli individual aminokislotalarni almashtirish orqali tuzatish mumkin. Bu yordamida DNK darajasida amalga oshiriladi mutagenez.

Insoniylashtirilgan ximeralarning nomlanishi ikkala belgi uchun ham o'zakni o'z ichiga oladi (-xi- + -zu-). Otelixizumab davolash uchun klinik tadkikotlar olib borilayotgan insonparvarlashgan ximeraning namunasidir romatoid artrit va qandli diabet.[4]

Tegishli CDRlarni inson antikoriga "iskala" ga qo'shib, insonparvarlashtirish

Ximerik oraliq hosil qilmasdan, insonparvarlashtirilgan antikor ishlab chiqarish mumkin. Insoniylashtirilgan antikorni "to'g'ridan-to'g'ri" yaratish, tegishli antikor "iskala" ("qabul qiluvchi" deb nomlangan) ichiga tegishli CDR kodlash segmentlarini ("donor" deb nomlangan, kerakli bog'lanish xususiyatlariga javobgar) kiritish orqali amalga oshirilishi mumkin. Yuqorida muhokama qilinganidek, bunga tegishli vektor yordamida rekombinant DNK usullari orqali erishiladi[3] va sutemizuvchi hujayralardagi ifoda. Ya'ni, sichqonchada (yoki boshqa odamda) kerakli xususiyatlarga ega bo'lishi uchun antikor ishlab chiqilgandan so'ng, ushbu antikor uchun kodlangan DNK izolyatsiya qilinishi, vektorga klonlanishi va ketma-ket. Antikor CDRlariga to'g'ri keladigan DNK ketma-ketligini aniqlash mumkin. Kerakli CDRlarning aniq ketma-ketligi ma'lum bo'lgach, ushbu ketma-ketlikni odamning antikor varianti uchun DNK o'z ichiga olgan konstruktsiyaga mos ravishda kiritish uchun strategiya ishlab chiqilishi mumkin.[5][6] Strategiyada ham foydalanish mumkin sintez CDR sekanslarini o'qishga asoslangan chiziqli DNK fragmentlari.

Alemtuzumab insonparvarlashtirishda kimyoviy oraliq moddasi bo'lmagan antitelning dastlabki namunasidir. Bunday holda, bog'lash uchun "Campath-1" monoklonal deb nomlangan CD52 sichqoncha tizimidan foydalanish. Keyin Campath-1 ning giperviziluvchan ko'chadanlari (uning CDR-larini o'z ichiga oladi va shu bilan CD52 ni bog'lash qobiliyatini beradi) ajratib olindi va odamning antikor doirasiga kiritildi.[1] Alemtuzumab B-hujayrali surunkali limfotsitik leykemiyani davolash uchun tasdiqlangan[7] Hozirda turli xil sharoitlar uchun klinik sinovlarda skleroz.[8]

Sichqonchani ishlatmasdan olingan inson terapiyasi uchun antikorlar

Inson terapiyasi uchun antikorlarni kashf qilish jarayonida sichqonlar yoki odam bo'lmagan boshqa sutemizuvchilarni ishlatishdan butunlay qochadigan texnologiyalar mavjud. Bunday tizimlarning misollariga turli xil "displey" usullari (birinchi navbatda) kiradi faj displeyi ), shuningdek, inson immunitetiga javoban paydo bo'ladigan B hujayralari darajasining yuqori darajasidan foydalanadigan usullar.

Ko'rsatish usullari

Ular antikorlarni ishlab chiqarishning tanlangan printsiplaridan foydalanadilar, ammo mikroorganizmlarni ekspluatatsiya qiladilar (xuddi shunday) faj displeyi ) yoki hatto hujayrasiz ekstraktlar (xuddi shunday) ribosoma displeyi ). Ushbu tizimlar antikor genini yaratishga tayanadi "kutubxonalar" bu butunlay odamning ajratilgan RNKidan olinishi mumkin periferik qon. Ushbu tizimlarning bevosita mahsulotlari antikor bo'laklari bo'lib, odatda Fab yoki scFv.

Bu shuni anglatadiki, displey usullari yordamida yaratilgan antikor fragmentlari to'liq insoniy ketma-ketlikda bo'lsa ham, ular to'liq antikor emas. Shu sababli, mohiyatan insonparvarlashtirishga o'xshash jarayonlar kelib chiqadigan yaqinlikni to'liq antikor tarkibiga kiritish va ifoda etish uchun ishlatiladi.

Adalimumab (Humira) - bu fag displeyi orqali yaratilgan inson terapiyasi uchun tasdiqlangan antikorning namunasi.[9][10]

Odam bemorlari yoki emlash oluvchilaridan antitellar

Monoklonal antikorlarni topishda inson immunitet reaktsiyasidan foydalanish mumkin. Oddiy qilib aytganda, odamning immunitetga qarshi ta'siri sichqonchani yoki boshqa odam bo'lmagan sutemizuvchilar kabi ishlaydi. Shuning uchun yuqumli kasallik, saraton yoki emlash kabi immunitet tizimiga duch keladigan odamlar ushbu muammoga qaratilgan monoklonal antikorlarning potentsial manbai hisoblanadi. Ushbu yondashuv, asosan, printsiplaridan foydalanadigan virusga qarshi terapiyani ishlab chiqishga juda mos keladi passiv immunitet. Ushbu yondashuvning variantlari printsipial ravishda namoyish etildi[11] va ba'zilari tijorat rivojlanishiga yo'l topmoqdalar.[12]

Shuningdek qarang

Adabiyotlar

  1. ^ a b Riechmann L, Klark M, Waldmann H, Winter G (1988). "Terapiya uchun odam antikorlarini qayta shakllantirish". Tabiat. 332 (6162): 323–7. doi:10.1038 / 332323a0. PMID  3127726.
  2. ^ Qirolicha C, Shnayder WP, Selick HE, Payne PW, Landolfi NF, Duncan JF, Avdalovich NM, Levitt M, Junghans RP, Waldmann TA (Dekabr 1989). "Interleykin 2 retseptorlari bilan bog'langan insoniylashtirilgan antikor". Proc Natl Acad Sci U S A. 86 (24): 10029–33. doi:10.1073 / pnas.86.24.10029. PMC  298637. PMID  2513570. (Bu "insoniylashtirilgan antikor" atamasini qo'llashning dastlabki namunasi.)
  3. ^ a b Norderhaug L, Olafsen T, Michaelsen TE, Sandlie I (may 1997). "Sutemizuvchi hujayralardagi rekombinant antikor molekulalarining vaqtinchalik va barqaror ekspresiyasi uchun ko'p qirrali vektorlar". J Immunol usullari. 204 (1): 77–87. doi:10.1016 / S0022-1759 (97) 00034-3. PMID  9202712.
  4. ^ Otelixizumab uchun klinik tadqiqotlar sahifalari ro'yxati
  5. ^ Kashmiri SV, De Paskalis R, Gonzales NR, Schlom J (may 2005). "SDR payvandlash - antikorlarni insonparvarlashtirishga yangi yondashuv". Usullari. 36 (1): 25–34. doi:10.1016 / j.ymeth.2005.01.003. PMID  15848072.
  6. ^ Xou S, Li B, Vang L, Qian V, Chjan D, Xong X, Van X, Guo Y (iyul 2008). "Kompyuter yordamida molekulyar modellashtirish asosida komplementarlikni aniqlaydigan mintaqani payvand qilish yo'li bilan anti-CD34 monoklonal antikorni gumanizatsiya qilish". J biokimyo. 144 (1): 115–20. doi:10.1093 / jb / mvn052. PMID  18424812.
  7. ^ Alemtuzumab uchun DrugBank-ga kirish
  8. ^ Alemtuzumab uchun klinik tadqiqotlar sahifalari
  9. ^ Kempeni J. (noyabr 1999). "D2E7 to'liq insonga qarshi anti-TNFalfa monoklonal antikor bilan erta klinik sinovlarning dastlabki natijalari". Ann Rheum Dis. 58 (Qo'shimcha 1): I70-2. doi:10.1136 / ard.58.2008.i70. PMC  1766582. PMID  10577977.
  10. ^ Rau R (noyabr 2002). "Faol romatoid artritni davolashda Adalimumab (to'liq odamda o'smaga qarshi nekroz omil alfa monoklonal antikor): beshta sinovning dastlabki natijalari". Ann Rheum Dis. 61 (Qo'shimcha 2): 70-3. doi:10.1136 / ard.61.suppl_2.ii70. PMC  1766697. PMID  12379628.
  11. ^ Stacy JE, Kausmally L, Simonsen B, Nordgard SH, Alsøe L, Michaelsen TE, Brekke OH (2003 yil dekabr). "B guruhi Neisseria meningitidisga qarshi odamning rekombinant antikorlarini to'g'ridan-to'g'ri scFv ekspresyon kutubxonalaridan ajratish". J Immunol usullari. 283 (1–2): 247–59. doi:10.1016 / j.jim.2003.09.015. PMID  14659916.
  12. ^ http://www.theraclone-science.com/pdf/Theraclone_ISTAR.pdf Arxivlandi 2016-03-03 da Orqaga qaytish mashinasi Monoklonal antikorlarning manbai sifatida inson kasallaridan foydalanish usulining misoli