DNKga qarshi emlash - DNA vaccination

DNKga qarshi emlash.
Shuningdek qarang: RNK vaktsinasi

DNKga qarshi emlash ning texnikasi transfektsiya qilish immunizatsiya qilingan turning hujayralariga ma'lum bir antijen DNK kodlash ketma-ketligi.[1][2]

DNKga qarshi vaktsinalar kasallik bilan in'ektsiya yo'li bilan himoya qiladi genetik jihatdan yaratilgan plazmid o'z ichiga olgan DNK kodlash ketma-ketligi antigen (lar) ga qarshi immun reaktsiya so'raladi, shuning uchun hujayralar antigenni to'g'ridan-to'g'ri ishlab chiqaradi va himoya qiladi immunologik javob.[3] DNK vaktsinalari odatdagidan ko'ra nazariy afzalliklarga ega vaksinalar shu jumladan, immunitetga javob turlarining keng doirasini keltirib chiqarish qobiliyati.[iqtibos kerak ] Bir nechta DNK vaktsinalari sinovdan o'tkazildi veterinariya foydalanish.[3] Ba'zi hollarda hayvonlarni kasallikdan himoya qilish mumkin, boshqalarda esa yo'q.[3] 2016 yil avgust holatiga ko'ra AQShda DNKga qarshi vaktsinalar inson tomonidan foydalanish uchun tasdiqlanmagan.[4] Yondashuv bo'yicha tadqiqotlar davom etmoqda virusli, bakterial va parazit odamlarda kasalliklar, shuningdek, bir nechta saraton kasalliklari.[iqtibos kerak ]

Tarix

Shuningdek qarang: Vaksina § tarixi

DNKga qarshi vaktsinalar "uchinchi avlod vaktsinalari" deb ataladi. "Yuz yildan oshiq vaqt davomida emlashga ikki yondashuvdan biri ta'sir ko'rsatdi: yoki o'ziga xos usulni joriy etish antijenler bunga qarshi immunitet tizimi to'g'ridan-to'g'ri reaksiyaga kirishadi yoki kasallikni keltirib chiqarmasdan xost ichida ko'payadigan va keyinchalik immunitet tizimini keltirib chiqaradigan antigenlarni sintez qiladigan jonli susaytirilgan yuqumli vositalarni kiritadi. "[3] "Yaqinda emlashga nisbatan tubdan yangi yondashuv ishlab chiqildi."[3]

DNK vaktsinalarida patogenning o'ziga xos oqsillarini (antigenlarini) kodlovchi DNK mavjud. DNK tanaga kiritiladi va hujayralar tomonidan qabul qilinadi, ularning normal metabolik jarayonlari ular qabul qilgan plazmiddagi genetik kod asosida oqsillarni sintez qiladi. Ushbu oqsillarda bakteriyalar yoki viruslarga xos bo'lgan aminokislotalar ketma-ketligi mintaqalari mavjud bo'lganligi sababli, ular begona deb tan olinadi va ularni xujayra hujayralari tomonidan qayta ishlanib, ularning yuzasida namoyish etilganda, immunitet tizimi ogohlantiriladi, so'ngra immun javoblarni keltirib chiqaradi.[5][6] Shu bilan bir qatorda, hujayraning kirib kelishini engillashtirish uchun DNK oqsil tarkibiga kiritilishi mumkin. Agar bu kapsid oqsil DNK tarkibiga kiradi, natijada vaksina jonli vaktsinaning ta'sirini reversiya xavfisiz birlashtirishi mumkin.

1983 yilda, Enzo Paoletti va Dennis Panicali Nyu-York Sog'liqni saqlash boshqarmasi ishlab chiqarish strategiyasini ishlab chiqdi rekombinant DNK oddiy konvertatsiya qilish uchun gen muhandisligi yordamida vaktsinalar chechakka qarshi emlash boshqa kasalliklarning oldini olishga qodir bo'lgan vaktsinalarga.[7] Ular DNKni o'zgartirdilar sigir genni boshqa viruslardan kiritish orqali virus (ya'ni Herpes simplex virusi, gepatit B va gripp ).[8][9] 1993 yilda Jeffri Ulmer va uning hamkasblari Merck tadqiqot laboratoriyalari sichqonlarga to'g'ridan-to'g'ri plazmidli DNK bilan gripp antigenini kodlash orqali yuborish hayvonlarni gripp virusi bilan keyingi eksperimental infektsiyadan himoya qilganligini ko'rsatdi.[10]. 2016 yilda DNKga qarshi emlash Zika virusi da odamlarda sinovlarni boshladi Milliy sog'liqni saqlash institutlari. Tadqiqotga 18 yoshdan 35 yoshgacha bo'lgan 120 ta sub'ektni jalb qilish rejalashtirilgan edi. Inovio farmatsevtika va GeneOne Life Science Mayamida Zikaga qarshi boshqa DNK vaktsinasini sinovlarini boshladi. NIH vaktsinasi yuqori bosim ostida yuqori qo'lga kiritiladi. Vaktsinalarni ishlab chiqarish 2016 yil avgust holatiga ko'ra hal qilinmagan.[4] OIVni oldini olish uchun DNK vaktsinalarini klinik sinovlari davom etmoqda.[11]

Ilovalar

Qo'shma Shtatlarda inson tomonidan foydalanish uchun DNKga qarshi vaktsinalar tasdiqlanmagan. Bir nechta eksperimental sinovlar kasallikdan himoya qilish uchun etarlicha kuchli javobni keltirib chiqardi va texnikaning foydaliligi odamlarda isbotlangan. A veterinariya Himoya qilish uchun DNK vaktsinasi otlar dan G'arbiy Nil virusi tasdiqlandi.[12][13]DNK immunizatsiyasi rivojlanish vositasi sifatida ham tekshirilmoqda antivenom zardob.[14] DNKni emlash texnologik platforma sifatida ishlatilishi mumkin monoklonal antikor induksiya.[15]

Afzalliklari

  • INFEKTSION xavfi yo'q[6]
  • Ikkala tomonidan antigen taqdimoti MHC I sinf va II sinf molekulalar[6]
  • T-xujayrasining javobini 1 turga yoki 2 turga qarab qutblang[6]
  • Immunitet reaktsiyasi qiziqish antigeniga qaratilgan
  • Rivojlanish va ishlab chiqarish qulayligi[6]
  • Saqlash va jo'natish uchun barqarorlik
  • Iqtisodiy samaradorlik
  • Peptid sinteziga, rekombinant oqsillarni ekspression va tozalashga va toksik yordamchi moddalardan foydalanishga bo'lgan ehtiyojni yo'qotadi[16]
  • Immunogenning uzoq muddatli barqarorligi[5]
  • In Vivo jonli ravishda ekspression translyatsiyadan keyingi modifikatsiyalar bilan oqsilning normal ökaryotik tuzilishga o'xshashligini ta'minlaydi[5]

Yomon ta'sir

  • Protein immunogenlari bilan cheklangan (bakterial polisakkaridlar kabi oqsilga asoslangan antigenlar uchun foydali emas)
  • Hujayra o'sishini boshqaruvchi genlarga ta'sir qilish xavfi[iqtibos kerak ]
  • DNKga qarshi antitel ishlab chiqarishni induktsiya qilish imkoniyati
  • Ishlab chiqarilgan antigenga (oqsilga) bardoshlik ehtimoli
  • Bakterial va parazit oqsillarni atipik qayta ishlash potentsiali[6]
  • Miya hujayralari kabi maqsadga muvofiq bo'lmagan hujayralarni transfektsiya qilish uchun plazmidli DNK nanozarralarini burun orqali purkash usulida qo'llash mumkin[17]

Plazmid vektorlari

Vektorli dizayn

DNKga qarshi vaktsinalar juda faol ekspression vektorlaridan foydalanilganda eng yaxshi immunitetga javob beradi. Bular plazmidlar odatda in vivo jonli ravishda haydash uchun kuchli virusli promouterdan iborat transkripsiya va tarjima genning (yoki bir-birini to'ldiruvchi DNK ) qiziqish.[18] Intron A ba'zan yaxshilash uchun kiritilishi mumkin mRNA barqarorlik va shuning uchun protein ekspresyonini oshiradi.[19] Plazmidlarga kuchli ham kiradi poliadenillanish / sigir kabi transkripsiyali tugatish signali o'sish gormoni yoki quyon beta-globulin poliadenillanish ketma-ketliklari.[5][6][20] Polikistronik vektorlar (bir nechta genom joylarida joylashgan) ba'zida bir nechta immunogenni yoki immunogen va immunostimulyator oqsilni ekspress qilish uchun tuziladi.[21]

Plazmid immunogen ifoda etiladigan "vosita" bo'lganligi sababli, maksimal oqsil ekspresiyasi uchun vektor dizayni optimallashtirish zarur.[21] Protein ekspresiyasini kuchaytirish usullaridan biri bu optimallashtirishdir kodon uchun patogen mRNKlardan foydalanish ökaryotik hujayralar. Patogenlar ko'pincha boshqacha AT-tarkib maqsad turlaridan ko'ra, shuning uchun genlar ketma-ketligi aks ettirish uchun immunogenning kodonlar maqsadli turlarda ko'proq qo'llanilishi uning ifodasini yaxshilashi mumkin.[22]

Yana bir e'tibor - bu tanlovdir targ'ibotchi. The SV40 promouter an'anaviy ravishda ishlatilgan vektorlar tadqiqotlari ko'rsatmaguncha ishlatilgan Rous Sarcoma virusi (RSV) promouterining ekspression ko'rsatkichlari ancha yuqori edi.[5] So'nggi paytlarda, ekspression stavkalari sitomegalovirus (CMV) darhol erta promouter. Ning kiritilishi Mason-Pfizer maymun virusi (MPV) -CTE bilan / holda rev[ajratish kerak ] konvertning ko'payishi. Bundan tashqari, CTE + rev tuzilishi CTE-ning yagona vektoriga qaraganda ancha immunogen edi.[23] Ekspression stavkalarini yaxshilash uchun qo'shimcha modifikatsiyalarga sintetik kuchaytiruvchi ketma-ketlikni kiritish kiradi intronlar, adenovirus uch tomonlama lider (TPL) ketma-ketliklari va poliadenilatsiya va transkripsiyaviy tugatish ketma-ketliklariga o'zgartirishlar.[5] DNK vaktsinasi plazmidiga misol pVAC, SV40 ishlatadigan targ'ibotchi.

Strukturaviy beqarorlik hodisalari plazmid ishlab chiqarish, DNKga qarshi emlash va gen terapiyasi uchun ayniqsa tashvishlidir.[24] Plazmidli magistralga tegishli aksessuarlar mintaqalar turli xil beqarorlik hodisalariga duch kelishi mumkin. Genetika beqarorligining taniqli katalizatorlari qatoriga to'g'ridan-to'g'ri, teskari va tandemli takrorlanishlar kiradi, ular ko'plab savdo-sotiqda mavjud bo'lgan klonlash va ekspression vektorlarida ko'zga tashlanadi. Shuning uchun begona kodlashmagan magistral ketma-ketliklarning qisqarishi yoki butunlay yo'q qilinishi bunday hodisalarning sodir bo'lish tendentsiyasini va natijada umumiy plazmidning rekombinogen potentsialini pasaytiradi.[25]

Plazmidalar mexanizmi

Plazmid o'zini transfektsiya qilingan hujayra yadrosiga kiritgandan so'ng, u begona antigenning peptid qatorini kodlaydi. Hujayra o'zining sirtida ham I, ham II sinf molekulalarining histokompatiblilik kompleksi (MHC) sinflari bo'lgan begona antigenni aks ettiradi. Keyin antigen taqdim etuvchi hujayra limfa tugunlariga boradi va T-hujayra signal bergan antigen peptidi va kostimulyator molekulasini taqdim etadi va immunitetga javob beradi.[26]

Vaktsina qo'shimchasining dizayni

Antikor yoki sitotoksik T-hujayra ta'sirini yaxshilash uchun immunogenlar turli xil uyali bo'linmalarga yo'naltirilishi mumkin. Yashirin yoki plazma membranasi - bog'langan antigenlar antikorlarning ta'sirini keltirib chiqarishda ta'sirchanroqdir sitosolik antijenler esa sitotoksik T hujayrasi javoblarni sitoplazmatik degradatsiyaga qarshi antigenlarga yo'naltirish va keyinchalik ularga kirish orqali yaxshilash mumkin asosiy gistosayish kompleksi (MHC) I sinf yo'l.[6] Bu odatda qo'shilishi bilan amalga oshiriladi N-terminal hamma joyda signallari.[27][28][29]

The konformatsiya oqsil antikorlarning ta'siriga ham ta'sir qilishi mumkin. "Tartiblangan" tuzilmalar (masalan, virusli zarralar) tartibsiz tuzilmalarga qaraganda samaraliroq.[30] Minigenlarning torlari (yoki MHC I klassi) epitoplar ) turli xil patogenlardan sitotoksik T hujayralarining ba'zi patogenlarga reaktsiyasini kuchaytiradi, ayniqsa TH epitopasi ham kiritilgan bo'lsa.[6]

Yetkazib berish

DNKga qarshi emlash va Gen terapiyasi texnikasi o'xshash.

DNKga qarshi vaktsinalar hayvonlarning to'qimalariga ko'plab usullar bilan kiritilgan. Ikki eng mashhur yondashuv 1999 yilda DNKni in'ektsiya qilish edi sho'r suv: standart hipodermik igna yordamida; yoki a yordamida gen qurol etkazib berish.[31] O'tgan yillarda bir nechta boshqa texnikalar hujjatlashtirildi.

Tuzli in'ektsiya

Odatda fiziologik eritmada mushak ichiga (IM) kiritiladi skelet mushaklari, yoki intradermal ravishda (ID), DNKni hujayradan tashqari bo'shliqlarga etkazib berish. Bunga 1) tomonidan yordam berilishi mumkin elektroporatsiya;[32] 2) bilan mushak tolalariga vaqtincha zarar etkazish orqali miotoksinlar kabi bupivakain; yoki 3) foydalanish bilan gipertonik fiziologik eritma yoki saxaroza.[5] Ushbu usulga immunitet ta'siriga omillar ta'sir qilishi mumkin, shu jumladan igna turi,[16] igna tekisligi, in'ektsiya tezligi, in'ektsiya hajmi, mushak turi va qabul qiluvchining yoshi, jinsi va fiziologik holati.[5]

Gen qurol

Gen qurol etkazib berish ballistik ravishda singib ketgan plazmid DNK (pDNA) ni tezlashtiradi oltin yoki volfram siqilgan holda, maqsadli hujayralarga mikropartikullar geliy tezlashtiruvchi vosita sifatida.[5][21]

Mukozal sirtni etkazib berish

Shu bilan bir qatorda alternativalar aerozol yalang'och DNKni tomizish mukozal kabi yuzalar burun va o'pka shilliq qavat,[21] va pDNA ning ko'zga topikal kiritilishi[33] va qinning shilliq qavati.[21] Mukozal sirtni etkazib berishga kationik yordamida ham erishildi lipozoma -DNK preparatlari,[6] biologik parchalanadigan mikrosferalar,[34][21] zaiflashgan Salmonalla,[35] Shigella yoki Listeriyalar ichak shilliq qavatiga og'iz orqali yuborish uchun vektorlar[36] va rekombinant adenovirus vektorlari.[21]

Polimer vositasi

Hujayra va sintetik bakteriyalardan tashkil topgan gibrid vosita polimerlar DNK vaktsinasini etkazib berish uchun ishlatilgan. An E. coli ichki yadro va poli (beta-amino efir) tashqi qatlam bilan bog'liq to'siqlarni hal qilish orqali samaradorlikni oshirish uchun sinergik ishlaydi. antigen taqdim etuvchi hujayra uyali qabul qilish va ichki holatni o'z ichiga olgan genlarni etkazib berish, fagosomal qochish va hujayra ichidagi yuk konsentratsiyasi. Sichqonlar tomonidan sinovdan o'tgan gibrid vektor immunitetga javob beradi.[37][38]

ELI immunizatsiyasi

DNKga qarshi emlashning yana bir yondashuvi ifoda kutubxonasi immunizatsiya (ELI). Ushbu texnikadan foydalanib, patogenning barcha genlari bir vaqtning o'zida yuborilishi mumkin, bu susaytirishi yoki o'stirilishi qiyin bo'lgan patogenlar uchun foydali bo'lishi mumkin.[5] ELI yordamida qaysi genlar himoya ta'sirini keltirib chiqarishi mumkin. Bu sinovdan o'tgan Mikoplazma pulmonis, a murin nisbatan kichik bo'lgan o'pka patogen genom. Hatto qisman ekspression kutubxonalari ham keyingi qiyinchiliklardan himoya qilishga yordam beradi.[39]

Jadvalda taqqoslash foydali

Jadval 2. Plazmid DNKni etkazib berish usullarining qisqacha mazmuni
Yetkazib berish usuliDNKning shakllanishiMaqsadli to'qimaDNK miqdori
ParenteralQarshi (gipodermik igna)Suvli eritma sho'r suvdaIM (skelet); Guvohnoma; (IV, teri osti va intraperitoneal o'zgaruvchan muvaffaqiyat bilan)Katta miqdor (taxminan 100-200 mkg)
Gen qurolDNK bilan qoplangan oltin munchoqlarED (qorin terisi); qinning shilliq qavati; jarrohlik yo'li bilan ta'sirlangan mushak va boshqa organlarKichik miqdorlar (16 ng dan kam)
Pnevmatik (reaktiv) in'ektsiyaSuvli eritmaEDJuda yuqori (300 mkg gacha)
Mahalliy dasturSuvli eritmaOkular; intravajinalKichik miqdorlar (100 mkg gacha)
Sitofektin vositachiligidaLipozomalar (kationik); mikrosferalar; rekombinant adenovirus vektorlari; zaiflashgan Shigella vektor; aerozollangan kationli lipid formulalarIM; IV (to'qimalarni tizimli ravishda transfektsiya qilish uchun); intraperitoneal; ichak shilliq qavatiga og'iz orqali immunizatsiya qilish; burun / o'pka shilliq pardalario'zgaruvchan
Jadval 3. Tez-tez ishlatiladigan DNK vaktsinasini yuborish usullarining afzalliklari va kamchiliklari
Yetkazib berish usuliAfzalligiKamchilik
Mushak ichiga yoki intradermal in'ektsiya
  • Maxsus etkazib berish mexanizmi yo'q
  • Doimiy yoki yarim doimiy ifoda
  • pDNA tezda tanaga tarqaladi
  • Mushak to'qimalarining morfologiyasi tufayli qabul qilish uchun samarasiz joy
  • Nisbatan katta miqdordagi DNK ishlatilgan
  • Th1 javobi talab qilinadigan javob bo'lmasligi mumkin
Gen qurol
  • DNK to'g'ridan-to'g'ri hujayralarga bombardimon qilinadi
  • DNKning oz miqdori
  • Th2 javobi talab qilinadigan javob bo'lmasligi mumkin
  • Tashuvchi sifatida inert zarralarni talab qiladi
Reaktiv in'ektsiya
  • Zarrachalar kerak emas
  • DNK hujayradan teri ostidan mm dan sm gacha bo'lishi mumkin
  • Yuqori bosim bilan chiqarib yuborilgandan keyin DNKning sezilarli qirqilishi
  • 10 marta pastroq ekspression va immunitetning past darajasi
  • DNKning katta miqdorini talab qiladi (300 mkg gacha)
Lipozomalar vositasida etkazib berish
  • Immunitetning yuqori darajadagi reaktsiyasini yaratish mumkin
  • Vena ichiga yuborilgan pDNA transfektsiyasini kuchaytirishi mumkin
  • Vena ichiga yuborilgan lipozom-DNK komplekslari barcha to'qimalarni transfektsiya qilishi mumkin
  • Intraazal tarzda yuborilgan lipozom-DNK komplekslari distal mukozada, shuningdek nazal mushaklarda va IgA antikorlarining paydo bo'lishiga olib kelishi mumkin.
  • Toksiklik
  • Sarumdagi samarasizlik
  • Kasallik yoki immunitet reaktsiyalari xavfi

Dozalash

Etkazib berish usuli samarali immunitet reaktsiyasini oshirish uchun zarur bo'lgan dozani aniqlaydi. Tuzli in'ektsiya uchun 10 mkg dan 1 mg gacha o'zgaruvchan DNK miqdori talab etiladi, ammo gen qurolini etkazib berish 100-1000 baravar kam talab qiladi.[40] Odatda, 0,2 mkg - 20 mkg talab qilinadi, ammo 16 ng gacha bo'lgan miqdorlar haqida xabar berilgan.[5] Ushbu miqdorlar turlarga qarab farq qiladi. Masalan, sichqonlar DNKga qaraganda 10 baravar kam DNK talab qiladi primatlar.[6] Tuzli in'ektsiyalar ko'proq DNKni talab qiladi, chunki DNK maqsadli to'qimalarning hujayradan tashqari bo'shliqlariga (odatda mushak) yuboriladi, bu erda jismoniy to'siqlarni engib o'tish kerak (masalan, bazal lamina va katta miqdorda biriktiruvchi to'qima ) hujayralar tomonidan qabul qilinishidan oldin, gen tabancasi etkazib berilganda DNKni hujayralarga to'g'ridan-to'g'ri qo'zg'atadi va majbur qiladi, natijada "isrofgarchilik" kamayadi.[5][6]

Immunitetga qarshi javob

T hujayralarining yordamchilari

Antigen taqdimoti T hujayralarini "sitotoksik" CD8 + hujayralari yoki "yordamchi" CD4 + hujayralariga aylanishini rag'batlantiradi. Sitotoksik hujayralar to'g'ridan-to'g'ri yuzalarida ma'lum bir begona yoki g'ayritabiiy molekulalarni olib yuradigan boshqa hujayralarga hujum qiladi. Yordamchi T hujayralari yoki Th hujayralari boshqa hujayralar bilan aloqa qilish orqali immun javoblarni muvofiqlashtiradi. Ko'pgina hollarda, T hujayralari antigenni faqat tanadagi MHC yoki yirik histokompatibillik kompleksi molekulalaridan biri tomonidan hujayra yuzasida olib borilsa taniydi.

DNKga qarshi immunizatsiya bir nechta T ni ko'tarishi mumkinH javoblar, shu jumladan limfoproliferatsiya va turli xil avlodlar sitokin profillar. DNK vaktsinalarining asosiy afzalligi, ularni T1 hujayralari yordamini TH1 yoki TH2 reaktsiyasiga yo'naltirish uchun ularni boshqarish qulayligi.[41] Har bir tur o'ziga xos naqshlarga ega limfokin va ximokin ekspressioni, o'ziga xos turlari immunoglobulinlar, limfotsitlar savdosi naqshlari va turlari tug'ma immunitet reaktsiyalari.

T hujayralarining boshqa turlari yordam beradi

Ko'tarilgan T-hujayra yordamining turiga etkazib berish usuli va ta'sirlangan immunogen turi hamda turli limfoid bo'linmalarning yo'nalishi ta'sir qiladi.[5][42] Odatda, sho'r igna in'ektsiyalari (IM yoki ID) TH1 reaktsiyalarini keltirib chiqaradi, gen qurolini etkazib berish esa TH2 reaktsiyalarini oshiradi.[41][42] Bu hujayra ichidagi va plazma membranasi bilan bog'langan antijenler uchun amal qiladi, ammo etkazib berish usulidan qat'i nazar, TH2 reaktsiyasini hosil qiladigan ko'rinadigan antigenlar uchun emas.[43]

Odatda ko'tarilgan T-hujayra yordami turi vaqt o'tishi bilan barqaror bo'lib, shubha ostiga qo'yilganda yoki keyingi emlashlardan keyin o'zgarmaydi, bu odatda naif namunada qarama-qarshi javob turini keltirib chiqarishi mumkin edi.[41][42] Biroq, Mor va boshq.. (1995)[18] sichqonning sirkumsporozoit oqsilini kodlovchi pDNA bilan immunizatsiya qilingan va kuchaytirilgan sichqonlar bezgak parazit Plazmodium yoelii (PyCSP) va dastlabki TH2 reaktsiyasi TH1 javobiga ko'tarilgandan so'ng o'zgarganligini aniqladi.

T-hujayraning har xil yordam turlari uchun asos

Ushbu turli xil usullar qanday ishlaydi, antigenning shakllari va T-hujayraning turli xil profillari tushunilmaydi. IM in'ektsiyasida ishlatiladigan nisbatan katta miqdordagi DNK TH1 reaktsiyalarining induktsiyasi uchun javobgardir deb o'ylar edilar. Biroq, dalillar TH turidagi dozaga bog'liq farqlarni ko'rsatmaydi.[41] Ko'tarilgan T-hujayra yordamining turi differentsial holat bilan belgilanadi antigen taqdim etuvchi hujayralar. Dendritik hujayralar ajratish uchun ajratish mumkin Il-12 (bu TH1 hujayralarining rivojlanishini qo'llab-quvvatlaydi) yoki Il-4 (bu TH2 javoblarini qo'llab-quvvatlaydi).[44] igna orqali yuborilgan pDNK bu endotsitlangan dendritik hujayraga kirib, keyinchalik TH1 uchun farqlash uchun rag'batlantiriladi sitokin ishlab chiqarish,[45] gen tabancasi esa DNKni hujayraga to'g'ridan-to'g'ri bombardimon qiladi va shu bilan TH1 stimulyatsiyasini chetlab o'tadi.

Polarizatsiyalangan T-hujayra yordamidan amaliy foydalanish

T-hujayra yordamidagi qutblanish ta'sir o'tkazishda foydalidir allergik javoblar va otoimmun kasalliklar. Otoimmun kasalliklarda maqsad o'z-o'zini yo'q qiladigan TH1 reaktsiyasini (unga bog'liq bo'lgan sitotoksik T hujayralari faoliyati bilan) buzilmaydigan TH2 javobiga o'tkazishdir. Bu preklinikgacha bo'lgan modellarda kerakli javob turini oldindan belgilashda muvaffaqiyatli qo'llanildi[6] va aniqlangan kasallik uchun javobni o'zgartirishda biroz muvaffaqiyatli.[46]

Sitotoksik T-hujayraning reaktsiyalari

DNKga qarshi vaktsinalarning afzalliklaridan biri shundaki, ular ularni chaqirishga qodir sitotoksik T limfotsitlar (CTL) jonli vaktsinalar bilan bog'liq bo'lgan o'ziga xos xavfisiz. CTL reaktsiyalari immunodominant va immunorezessiv CTL epitoplariga qarshi ko'tarilishi mumkin,[47] shuningdek subdominant CTL epitoplari,[34] tabiiyni taqlid qiladigan ko'rinishda infektsiya. Bu CTL epitoplarini va ularning immunitetni ta'minlashdagi rolini baholashda foydali vosita bo'lishi mumkin.

Sitotoksik T-hujayralar kichikni taniydi peptidlar (8-10 aminokislotalar ) murakkablashgan MHC I sinf molekulalar.[48] Ushbu peptidlar tanazzulga uchragan va MHC sinf I molekulasiga etkazilgan endogen sitosolik oqsillardan olinadi. endoplazmatik to'r (ER).[48] Gen mahsulotlarini to'g'ridan-to'g'ri ERga yo'naltirish (an qo'shilishi bilan) amino-terminal kiritish ketma-ketlik ) shunday qilib CTL javoblarini yaxshilashi kerak. Bu rekombinant yordamida muvaffaqiyatli namoyish etildi emlash ifoda etuvchi viruslar gripp oqsillar,[48] ammo bu printsip DNK vaktsinalariga ham tegishli bo'lishi kerak. Qo'shilishi bilan hujayra ichidagi degradatsiyaga qarshi antigenlarni maqsadli yo'naltirish (va shu tariqa MHC I yo'lga kirish). hamma joyda signal ketma-ketliklari yoki boshqa signal ketma-ketliklarining mutatsiyasi, CTL javoblarini oshirishda samarali ekanligi ko'rsatildi.[28]

KTL reaktsiyalari kabi ko-stimulyatorli molekulalar bilan birgalikda emlash orqali yaxshilanishi mumkin B7-1 yoki B7-2 gripp nukleoproteiniga qarshi DNK vaktsinalari uchun,[47][49] yoki GM-CSF murin bezgak modeliga qarshi DNK vaktsinalari uchun P. yoelii.[50] IL-12 va TCA3 ko-stimulyatorli molekulalarini kodlovchi plazmidlar bilan birgalikda emlash OIV-1 va gripp nukleoprotein antijenlariga qarshi CTL faolligini oshirishi aniqlandi.[49][51]

Gumoral (antikor) javob

Antikor va antigenlarning sxematik diagrammasi

DNKga qarshi emlash natijasida kelib chiqadigan antitel reaktsiyalariga ko'pgina o'zgaruvchilar, shu jumladan antigen turi ta'sir qiladi; antigen joylashuvi (ya'ni hujayra ichidagi va salgılanan); soni, chastotasi va immunizatsiya dozasi; antijeni etkazib berish joyi va usuli.

Antikor reaktsiyasining kinetikasi

Bitta DNK in'ektsiyasidan so'ng gumoral reaktsiyalar rekombinant oqsil bilan bitta in'ektsiyadan ko'ra ancha uzoq umr ko'rishlari mumkin. Antikorlarga qarshi javoblar gepatit B virus (HBV) zarf oqsili (HBsAg) 74 haftagacha kuchaytirilmasdan saqlanib turadi, shu bilan birga grippga qarshi himoya reaktsiyasini umrbod saqlab turadi. gemagglutinin gen tabancasi etkazib berilgandan so'ng sichqonlarda namoyish etildi.[52] Antikor ajratuvchi hujayralar ilik va taloq uzoq muddatli antikor ishlab chiqarish uchun va odatda bir yildan keyin u erda lokalizatsiya qilinadi.[52]

Tabiiy (virusli) infektsiya natijasida hosil bo'lgan antikorlarning reaktsiyalarini taqqoslash, rekombinant oqsil bilan immunizatsiya va pDNA bilan immunizatsiya 4-jadvalda keltirilgan. DNK bilan ko'tarilgan antikorlarning reaktsiyalari tabiiy infektsiya yoki rekombinant oqsillarga qarshi immunizatsiya sodir bo'lgandan ancha sekin ko'tariladi. Sichqonlarda eng yuqori titrlarga erishish uchun 12 xaftadan ko'proq vaqt talab qilinishi mumkin, ammo tezlikni oshirish intervalni pasaytirishi mumkin. Ushbu javob, ehtimol, bir necha hafta davomida past darajadagi antigen darajasiga bog'liq bo'lib, antitel reaktsiyasining asosiy va ikkinchi darajali bosqichlarini qo'llab-quvvatlaydi. Surunkali gepatit bilan kasallangan kattalarga HBV kichik va o'rta konvert oqsilini ifodalovchi DNK vaktsinasi kiritildi. Vaktsina maxsus interferon gamma hujayralarini ishlab chiqarishga olib keldi. O'rta zarf oqsillari antigenlari uchun o'ziga xos T hujayralari ishlab chiqilgan. Bemorlarning immun reaktsiyasi HBV infektsiyasini nazorat qilish uchun etarli darajada kuchli emas edi[53]

Jadval 4. DNKga qarshi emlashlar, oqsillarni emlash va virusli infektsiyalar natijasida kelib chiqadigan T-ga qarshi antitellarning reaktsiyalarini taqqoslash
 Immunizatsiya usuli
DNKga qarshi emlashRekombinant oqsilTabiiy infektsiya
Induktiv antigen miqdoringmg? (ng-mkg)
Antigen taqdimotining davomiyligibir necha hafta<1 haftabir necha hafta
Antikor reaktsiyasining kinetikasisekin ko'tarilishtez ko'tarilishtez ko'tarilish
IgG ni yuqori darajada olish uchun emlashlar soni va ASC ning suyak iligiga ko'chishibittaikkitasibitta
Ab izotipi (murin modellari)C'ga bog'liq yoki C'ga bog'liq emasC'ga bog'liqC’dan mustaqil

Bundan tashqari, DNKga qarshi emlash natijasida paydo bo'lgan o'ziga xos antikorlarning titrlari rekombinant oqsil bilan emlanganidan keyin past bo'ladi. Shu bilan birga, DNK immunizatsiyasidan kelib chiqqan antitellar rekombinant oqsil bilan indüklenen antikorlardan ko'ra mahalliy epitoplarga ko'proq yaqinligini ko'rsatadi. Boshqacha qilib aytganda, DNK immunizatsiyasi sifat jihatidan yuqori javobni keltirib chiqaradi. Antikorlarni DNK bilan bitta emlashdan keyin chaqirish mumkin, aksincha rekombinant oqsillarga qarshi emlashlar kuchaytirishni talab qiladi. DNK immunizatsiyasi immun reaktsiyasining TH profilini va shu bilan antikor izotipini tanqisligi uchun ishlatilishi mumkin, bu tabiiy infektsiya yoki rekombinant protein immunizatsiyasi bilan mumkin emas. DNK tomonidan hosil qilingan antikor reaktsiyalari tayyorgarlik vositasi sifatida foydalidir. Masalan, reaktiv sifatida foydalanish uchun poliklonal va monoklonal antikorlar hosil bo'lishi mumkin.

DNK bilan ko'tarilgan immunitet reaktsiyalarining mexanik asoslari

DNKni qabul qilish mexanizmi

DNKni qabul qilish va undan keyingi ekspression birinchi marta namoyish etilganida jonli ravishda yilda muskul hujayralar,[54] T-tubulalar keng tarmog'i tufayli bu hujayralar noyob deb hisoblangan. Foydalanish elektron mikroskopi, DNKni qabul qilishni engillashtirishi taklif qilingan caveolae (yoki, klatrin bilan qoplanmagan chuqurliklar).[55] Biroq, keyingi tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, boshqa hujayralar (masalan keratinotsitlar, fibroblastlar va epiteliy Langerhans hujayralari ) DNKni ichki holatga keltirishi mumkin.[46][56] DNKni qabul qilish mexanizmi noma'lum.

Ikki nazariya ustunlik qiladi - bu jonli ravishda shunga o'xshash usulda DNKni qabul qilish o'ziga xos bo'lmagan holda sodir bo'ladi fago - yoki pinotsitoz,[21] yoki maxsus retseptorlari orqali.[57] Ular 30kDa sirtini o'z ichiga olishi mumkin retseptorlari, yoki makrofag retseptorlari. 30kDa sirt retseptorlari 4500 ot kuchiga ega DNK fragmentlari bilan bog'lanib (ular keyinchalik ichki holatga keltiriladi) va professional APC va T-hujayralarida uchraydi. Makrofagni tozalash retseptorlari turli xil makromolekulalar, shu jumladan poli bilan bog'lanadiribonukleotidlar va shuning uchun DNKni qabul qilish uchun nomzodlar.[57][58] Retseptorlari vositasida DNKni qabul qilish borligi bilan osonlashtirilishi mumkin poliganilat ketma-ketliklari. Gen qurolini etkazib berish tizimlari, kationli lipozomli qadoqlash va boshqa etkazib berish usullari ushbu kirish usulini chetlab o'tadi, ammo uni tushunish chorvachilikda muhim bo'lishi mumkin bo'lgan xarajatlarni kamaytirishda (masalan, sitofektinlarga bo'lgan talabni kamaytirishda) foydali bo'lishi mumkin.

Suyak iligidan hosil bo'lgan hujayralar tomonidan antigen taqdimoti

Dendritik hujayra.

Foydalanish bo'yicha tadqiqotlar kimerik sichqonlar antigenni dendritik hujayralar, makrofaglar va ixtisoslashgan suyak iligidan hosil bo'lgan hujayralar taqdim etishini ko'rsatdi. B hujayralari professional deb nomlangan antigen taqdim etuvchi hujayralar (APC).[49][59] Genga qarshi qurolni emlashdan keyin teriga o'tkaziladi Langerhans hujayralari drenajga ko'chirish limfa tuguni antijenlarni taqdim etish.[6] IM va ID in'ektsiyalaridan so'ng dendritik hujayralar drenajlovchi limfa tugunida antigen mavjud[56] periferik qonda transfekte qilingan makrofaglar topilgan.[60]

Dendritik hujayralar yoki makrofaglarning to'g'ridan-to'g'ri transfektsiyasidan tashqari, IM, ID va gen qurollari DNKni etkazib berishdan keyin o'zaro faoliyat priming paydo bo'ladi. Suyak iligidan hosil bo'lgan hujayra MHC klassi 1 tarkibida boshqa hujayrada sintez qilingan oqsillardan peptidlarni taqdim etganda, o'zaro bog'liqlik paydo bo'ladi, bu T-hujayraning sitotoksik ta'sirini kuchaytirishi mumkin va to'liq birlamchi immunitet reaktsiyasi uchun muhimdir.[6][61]

Maqsadli sayt roli

IM va ID DNKni etkazib berish immun javoblarni boshqacha tarzda boshlaydi. Terida keratinotsitlar, fibroblastlar va Langerhans hujayralari antigenlarni qabul qilib, ifoda etadilar va antitellarning asosiy javobini keltirib chiqaradilar. Transfektsiya qilingan Langerhans hujayralari teridan (12 soat ichida) drenajlovchi limfa tuguniga ko'chib o'tadi, u erda B va T hujayralarining ikkinchi darajali reaktsiyalari bo'ladi. Skelet mushaklarida yoyilgan mushak hujayralari ko'pincha transfektsiyalanadi, ammo immunitet ta'sirida ahamiyatsiz ko'rinadi. Buning o'rniga, DNK emlangan limfa tuguniga bir necha daqiqada "yuviladi", bu erda distal dendritik hujayralar transfektsiya qilinadi va keyin immunitetga javob beradi. Transfektsiya qilingan miyozitlar professional BTRlarni sotish uchun antigenning "suv ombori" vazifasini bajaradi.[21][54][61]

Immunitet ta'sirini ta'minlash

DNKga qarshi emlash antigen-antikor komplekslarini namoyish qilish orqali samarali immunitet xotirasini hosil qiladi follikulyar dendritik hujayralar (FDC), bu B hujayralarining kuchli stimulyatorlari. T-hujayralarni shunga o'xshash, germinal markaz dendritik hujayralar tomonidan rag'batlantirish mumkin. FDK immunitet xotirasini yaratishga qodir, chunki antitellar ishlab chiqarilishi antigenning uzoq muddatli ekspresiyasini "qoplaydi", bu esa antigen-antikor immunokomplekslarini hosil bo'lishiga va FDC tomonidan namoyish qilinishiga imkon beradi.[6]

Interferonlar

Ham yordamchi, ham sitotoksik T-hujayralar interferonlarni ajratib virusli infektsiyalarni boshqarishi mumkin. Sitotoksik T hujayralari odatda virus bilan yuqtirilgan hujayralarni o'ldiradi. Shu bilan birga, ular antiviral sitokinlarni ajratish uchun ham rag'batlantirilishi mumkin IFN-γ va TNF-a, bu hujayrani o'ldirmaydi, ammo virusli tarkibiy qismlarning ekspressionini past darajadagi tartibga solish orqali virusli infektsiyani cheklaydi.[62] DNKga qarshi emlashlar buzilmaydigan IFN vositachiligi bilan virusli infektsiyalarni oldini olish uchun ishlatilishi mumkin. Bu gepatit B uchun ko'rsatildi.[63] IFN-γ bezgak infektsiyasini nazorat qilishda juda muhimdir[64] va bezgakka qarshi DNK vaktsinalarini ko'rib chiqishdir.

Immunitet reaktsiyasini modulyatsiyasi

Sitokin modulyatsiyasi

Samarali emlash ma'lum bir patogen uchun tegishli immunitetni keltirib chiqarishi kerak. DNK vaktsinalari T-hujayra yordamini TH1 yoki TH2 profillariga qarab qutblashishi va kerak bo'lganda CTL va / yoki antikor hosil qilishi mumkin. Bunga antigen (ya'ni hujayra ichidagi va sekretsiya qilingan) shaklini, etkazib berish usuli va dozasini yoki dozasini o'zgartirish orqali erishish mumkin.[41][42][65][66][67] Bundan tashqari, immun regulyativ molekulalarni, ya'ni sitokinlarni kodlovchi plazmid DNKni birgalikda boshqarish orqali ham amalga oshirilishi mumkin. limfokinlar yoki birgalikda stimulyatsiya qiluvchi molekulalar. Ushbu "genetik yordamchi moddalar "Quyidagi tarzda boshqarilishi mumkin:

  • biri immunogenni, ikkinchisi sitokinni kodlovchi 2 plazmidning aralashmasi
  • oraliq mintaqalar bilan ajratilgan bitta bi yoki polikistronik vektor
  • plazmid bilan kodlangan kimera yoki termoyadroviy oqsil

Umuman olganda, yallig'lanishga qarshi vositalarni birgalikda qo'llash (masalan, turli xil) interleykinlar, o'simta nekrozi omil, va GM-CSF) va TH2 ni keltirib chiqaradigan sitokinlar antikorlarning ta'sirini kuchaytiradi, yallig'lanishga qarshi vositalar va TH1ni keltirib chiqaradigan sitokinlar gumoral reaktsiyalarni pasaytiradi va sitotoksik ta'sirlarni kuchaytiradi (virusni himoya qilishda muhimroq). Kabi ko-stimulyatorli molekulalar B7-1, B7-2 va CD40L ba'zan ishlatiladi.

Ushbu kontseptsiya pDNA kodlashning mahalliy qo'llanilishida qo'llanilgan Il-10.[33] B7-1 kodlovchi plazmid (APC laridagi ligand) o'simta modellarida immunitet reaktsiyasini muvaffaqiyatli oshirdi. GM-CSF va sirksporozoit oqsilini kodlovchi plazmidlarni aralashtirish P. yoelii (PyCSP) keyingi chaqiriqlardan himoyani kuchaytirdi (plazmid bilan kodlangan PyCSP esa bunday qilmadi). GM-CSF dendritik hujayralarni antigenni samaraliroq ko'rsatishiga va IL-2 ishlab chiqarilishini va TH hujayralarining faollashishini kuchayishiga olib keldi, shu bilan immunitetning kuchayishiga olib keldi.[50] Buni avval pPyCSP va pGM-CSF aralashmasi bilan primerlash, so'ngra rekombinant bilan kuchaytirish orqali yaxshilash mumkin. poxvirus PyCSP-ni ifoda etuvchi.[68] Shu bilan birga, GM-CSF (yoki IFN-b, yoki IL-2) ni kodlovchi plazmidlarni va termoyadroviy oqsillarni birgalikda in'ektsiyasi P. chabaudi merozoit sirt oqsili 1 (C-terminus) -gepatit B virusi sirt oqsili (PcMSP1-HBs) pPcMSP1-HB yuborish orqali olingan himoya bilan taqqoslaganda, qiyinchiliklardan himoyani bekor qildi.[30]

Genetik adjuvantlarning afzalliklari ularning arzonligi va oddiy administratsiyasi, shuningdek beqarorlikni oldini olishdir rekombinant sitokinlar va potentsial toksik, "an'anaviy" yordamchi moddalar (masalan alum, kaltsiy fosfat, monofosforil lipid A, vabo toksin, kationli va mannan bilan qoplangan liposomalar, QS21, karboksimetil tsellyuloza va ubenimix ).[6][21] Shu bilan birga, sitokinni uzoq muddat ekspression qilishning potentsial toksikligi aniqlanmagan. Tijorat jihatdan muhim bo'lgan ko'plab hayvon turlarida sitokin genlari aniqlanmagan va ajratilmagan. Bundan tashqari, plazmid bilan kodlangan turli sitokinlar immunitet tizimini etkazib berish vaqtiga qarab har xil modulyatsiya qiladi. Masalan, ba'zi sitokin plazmid DNKlari immunogen pDNKdan keyin eng yaxshi etkazib beriladi, chunki oldindan yoki birgalikda etkazib berish o'ziga xos reaktsiyalarni kamaytirishi va o'ziga xos bo'lmagan reaktsiyalarni oshirishi mumkin.[69]

Immunostimulyatorli CpG motiflari

Plazmid DNKning o'zi immunitet tizimiga yordamchi ta'sir ko'rsatadigan ko'rinadi.[5][6] Bakteriyalardan olingan DNK tug'ma immunitetni himoya qilish mexanizmlarini, dendritik hujayralarni faollashishini va TH1 sitokinlarini ishlab chiqarishni boshlashi mumkin.[45][70] Bu immunostimulyator bo'lgan ba'zi CpG dinukleotidlar ketma-ketligini tan olish bilan bog'liq.[66][71] CpG stimulyatori (CpG-S) ketma-ketliklari bakteriyalardan kelib chiqqan DNKda eukariotlarga qaraganda yigirma marta tez-tez uchraydi. Buning sababi, eukaryotlar "CpG supressiyasini" namoyish etadi - ya'ni CpG dinukleotid juftlari kutilganidan ancha kam uchraydi. Bundan tashqari, CpG-S sekanslari gipometillanadi. Bu bakterial DNKda tez-tez uchraydi, eukaryotlarda uchraydigan CpG motiflari sitozin nukleotidida metillanadi. Aksincha, immun javobning faollashishini inhibe qiluvchi nukleotidlar ketma-ketligi (CpG neytrallashtiruvchi yoki CpG-N deb ataladi) ökaryotik genomlarda ko'proq ifodalanadi.[72] Optimal immunostimulyatsion ketma-ketlik - bu ikki 5 'bilan yonma-yon joylashgan metilatsiz CpG dinukleotidi. purinlar va ikkita 3 ' pirimidinlar.[66][70] Bundan tashqari, ushbu immunostimulyatordan tashqaridagi yonbosh mintaqalar hexamer bo'lishi kerak guanin - maqsadli hujayralarga bog'lanishini va qabul qilinishini ta'minlash uchun boy.

Tug'ma tizim DNK bilan kodlangan oqsilga qarshi reaktsiyani o'rnatish uchun adaptiv immunitet tizimi bilan ishlaydi. CpG-S sekanslari poliklonal B-hujayraning faollashuviga va sitokin ekspressioni va sekretsiyasining regulyatsiyasini keltirib chiqaradi.[73] Stimulyatsiya qilingan makrofaglar IL-12 ni chiqaradi, Il-18, TNF-a, IFN-a, IFN-b va IFN-b, stimulyatsiya qilingan B-hujayralar esa IL-6 va ba'zi bir IL-12 ni chiqaradi.[21][73][74]

DNK vaktsinalarining plazmid omurgasida CpG-S va CpG-N ketma-ketliklarini manipulyatsiyasi kodlangan antigenga immunitetning ta'sirini ta'minlashi va TH1 fenotipiga qarshi immunitetni boshqarishi mumkin. Agar patogen himoya qilish uchun TH reaktsiyasini talab qilsa, bu foydali bo'ladi. CpG-S sekanslari, shuningdek, DNK uchun ham, rekombinant oqsil bilan emlash uchun ham tashqi yordamchi sifatida ishlatilib, o'zgaruvchan muvaffaqiyat darajalariga ega. Gipometillangan CpG motifli boshqa organizmlar B-hujayra poliklonal kengayishining stimulyatsiyasini namoyish etdilar.[iqtibos kerak ] Buning ortidagi mexanizm oddiy metilatsiyaga qaraganda murakkabroq bo'lishi mumkin - gipometillangan murin DNKsi immunitetga javob beradigan topilmadi.

Immunostimulyatorli CpG ketma-ketligining ko'pgina dalillari murin tadqiqotlaridan kelib chiqadi. Ushbu ma'lumotlarni boshqa turlarga ekstrapolyatsiya qilish ehtiyotkorlikni talab qiladi - alohida turlar har xil yonma-yon ketma-ketlikni talab qilishi mumkin, chunki tozalash retseptorlarining majburiy o'ziga xos xususiyatlari turlarga qarab farq qiladi. Bundan tashqari, kavsh qaytaruvchi hayvonlar kabi turlar oshqozon-ichak trakti yuki katta bo'lganligi sababli immunostimulyator sekanslarga befarq bo'lishi mumkin.

Muqobil kuchaytirish

Rekombinant oqsil yoki rekombinant poxviruslarni yuborish orqali DNK bilan hosil qilingan immun reaktsiyalarni kuchaytirishi mumkin. "Prime-boost" strategies with recombinant protein have successfully increased both neutralising antibody titre, and antibody avidity and persistence, for weak immunogens, such as HIV-1 envelope protein.[6][75] Recombinant virus boosts have been shown to be very efficient at boosting DNA-primed CTL responses. Priming with DNA focuses the immune response on the required immunogen, while boosting with the recombinant virus provides a larger amount of expressed antigen, leading to a large increase in specific CTL responses.

Prime-boost strategies have been successful in inducing protection against malarial challenge in a number of studies. Primed mice with plasmid DNA encoding Plasmodium yoelii circumsporozoite surface protein (PyCSP), then boosted with a recombinant vaccinia virus expressing the same protein had significantly higher levels of antibody, CTL activity and IFN-γ, and hence higher levels of protection, than mice immunized and boosted with plasmid DNA alone.[76] This can be further enhanced by priming with a mixture of plasmids encoding PyCSP and murine GM-CSF, before boosting with recombinant vaccinia virus.[68] An effective prime-boost strategy for the simiya malarial model P. knowlesi has also been demonstrated.[77] Rhesus maymunlari were primed with a multicomponent, multistage DNA vaccine encoding two liver-stage antigens – the circumsporozoite surface protein (PkCSP) and sporozoite surface protein 2 (PkSSP2) – and two blood stage antigens – the apical merozoite surface protein 1 (PkAMA1) and merozoite surface protein 1 (PkMSP1p42). They were then boosted with a recombinant canarypox virus encoding all four antigens (ALVAC-4). Immunized monkeys developed antibodies against sporozoites and infected erythrocytes, and IFN-γ-secreting T-cell responses against peptides from PkCSP. Partial protection against sporozoite challenge was achieved, and mean parasitemia was significantly reduced, compared to control monkeys. These models, while not ideal for extrapolation to P. falciparum in humans, will be important in pre-clinical trials.

Enhancing immune responses

DNK

The efficiency of DNA immunization can be improved by stabilising DNA against degradation, and increasing the efficiency of delivery of DNA into antigen taqdim etuvchi hujayralar.[6] This has been demonstrated by coating biodegradable cationic microparticles (such as poly(lactide-co-glycolide) formulated with cetyltrimethylammonium bromide ) with DNA. Such DNA-coated microparticles can be as effective at raising CTL as recombinant viruses, especially when mixed with alum. Particles 300 nm in diameter appear to be most efficient for uptake by antigen presenting cells.[6]

Alphavirus vectors

Recombinant alphavirus-based vectors have been used to improve DNA vaccination efficiency.[6] The gene encoding the antigen of interest is inserted into the alphavirus replicon, replacing structural genes but leaving non-structural replicase genes intact. The Sindbis virusi va Semliki o'rmon virusi have been used to build recombinant alfavirus nusxalar. Unlike conventional DNA vaccinations alphavirus vectors kill transfected cells and are only transiently expressed. Alphavirus replicase genes are expressed in addition to the vaccine insert. It is not clear how alphavirus replicons raise an immune response, but it may be due to the high levels of protein expressed by this vector, replicon-induced cytokine responses, or replicon-induced apoptosis leading to enhanced antigen uptake by dendritic cells.

Shuningdek qarang

Adabiyotlar

  1. ^ Developing Snake antivenom sera by genetic immunization
  2. ^ DNA immunization as a technology platform for monoclonal antibody induction
  3. ^ a b v d e "DNA vaccines". Jahon Sog'liqni saqlash tashkiloti.
  4. ^ a b Regalado, Antonio (2 August 2016). "The U.S. government has begun testing its first Zika vaccine in humans". MIT Technology Review Magazine. Olingan 2016-08-06.
  5. ^ a b v d e f g h men j k l m n Alarcon JB, Waine GW, McManus DP (1999). "DNA Vaccines: Technology and Application as Anti-parasite and Anti-microbial Agents". Advances in Parasitology Volume 42. Advances in Parasitology. 42. pp. 343–410. doi:10.1016/S0065-308X(08)60152-9. ISBN  9780120317424. PMID  10050276.
  6. ^ a b v d e f g h men j k l m n o p q r s t siz v Robinson HL, Pertmer TM (2000). DNA vaccines for viral infections: basic studies and applications. Viruslarni o'rganish bo'yicha yutuqlar. 55. 1-74 betlar. doi:10.1016/S0065-3527(00)55001-5. ISBN  9780120398553. PMID  11050940.
  7. ^ White LO, Gibb E, Newham HC, Richardson MD, Warren RC (July 1979). "Comparison of the growth of virulent and attenuated strains of Candida albicans in the kidneys of normal and cortison-treated mice by chitin assay". Mikopatologiya. 67 (3): 173–7. doi:10.1007/bf00470753. PMID  384256. S2CID  31914107.
  8. ^ Paoletti E, Lipinskas BR, Samsonoff C, Mercer S, Panicali D (January 1984). "Construction of live vaccines using genetically engineered poxviruses: biological activity of vaccinia virus recombinants expressing the hepatitis B virus surface antigen and the herpes simplex virus glycoprotein D". Amerika Qo'shma Shtatlari Milliy Fanlar Akademiyasi materiallari. 81 (1): 193–7. Bibcode:1984PNAS...81..193P. doi:10.1073/pnas.81.1.193. PMC  344637. PMID  6320164.
  9. ^ US Patent 4722848 - Method for immunizing animals with synthetically modified vaccinia virus
  10. ^ Ulmer, J. B.; Donnelly, J. J.; Parker, S. E.; Rhodes, G. H.; Felgner, P. L.; Dwarki, V. J.; Gromkowski, S. H.; Deck, R. R.; DeWitt, C. M.; Friedman, A.; Et, Al (1993-03-19). "Heterologous protection against influenza by injection of DNA encoding a viral protein". Ilm-fan. 259 (5102): 1745–1749. doi:10.1126/science.8456302. ISSN  0036-8075. PMID  8456302.
  11. ^ Chen Y, Wang S, Lu S (February 2014). "DNA Immunization for HIV Vaccine Development". Vaksinalar. 2 (1): 138–59. doi:10.3390/vaccines2010138. PMC  4494200. PMID  26344472.
  12. ^ "Fort Dodge Animal Health Announces Approval of West Nile Virus DNA Vaccine for Horses". PR Newswire. 2005-07-18. Arxivlandi asl nusxasi 2011-05-16. Olingan 2007-11-21.
  13. ^ "CDC and Fort Dodge Animal Health Achieve First Licensed DNA Vaccine". CDC. 2005-07-18. Arxivlandi asl nusxasi 2007-08-20. Olingan 2007-11-21.
  14. ^ Developing Snake antivenom sera by genetic immunization
  15. ^ DNA immunization as a technology platform for monoclonal antibody induction
  16. ^ a b Sedegah M, Hedstrom R, Hobart P, Hoffman SL (October 1994). "Protection against malaria by immunization with plasmid DNA encoding circumsporozoite protein". Amerika Qo'shma Shtatlari Milliy Fanlar Akademiyasi materiallari. 91 (21): 9866–70. Bibcode:1994PNAS...91.9866S. doi:10.1073/pnas.91.21.9866. JSTOR  2365723. PMC  44918. PMID  7937907.
  17. ^ Harmon, B. T.; Aly, A. E.; Padegimas, L.; Sesenoglu-Laird, O.; Cooper, M. J.; Waszczak, B. L. (2014). "Intranasal administration of plasmid DNA nanoparticles yields successful transfection and expression of a reporter protein in rat brain". Gen terapiyasi. 21 (5): 514–521. doi:10.1038/gt.2014.28. PMID  24670994. S2CID  5560134.
  18. ^ a b Mor G, Klinman DM, Shapiro S, Hagiwara E, Sedegah M, Norman JA, Hoffman SL, Steinberg AD (August 1995). "Complexity of the cytokine and antibody response elicited by immunizing mice with Plasmodium yoelii circumsporozoite protein plasmid DNA". Immunologiya jurnali. 155 (4): 2039–46. PMID  7636255.
  19. ^ Leitner WW, Seguin MC, Ballou WR, Seitz JP, Schultz AM, Sheehy MJ, Lyon JA (December 1997). "Immune responses induced by intramuscular or gene gun injection of protective deoxyribonucleic acid vaccines that express the circumsporozoite protein from Plasmodium berghei malaria parasites". Immunologiya jurnali. 159 (12): 6112–9. PMID  9550412.
  20. ^ Böhm W, Kuhröber A, Paier T, Mertens T, Reimann J, Schirmbeck R (June 1996). "DNA vector constructs that prime hepatitis B surface antigen-specific cytotoxic T lymphocyte and antibody responses in mice after intramuscular injection". Immunologik usullar jurnali. 193 (1): 29–40. doi:10.1016/0022-1759(96)00035-X. PMID  8690928.
  21. ^ a b v d e f g h men j k Lewis PJ, Babiuk LA (1999). DNA vaccines: a review. Advances in Virus Research. 54. Akademik matbuot. pp. 129–88. doi:10.1016/S0065-3527(08)60367-X. ISBN  978-0-12-039854-6. PMID  10547676.
  22. ^ André S, Seed B, Eberle J, Schraut W, Bültmann A, Haas J (February 1998). "Increased immune response elicited by DNA vaccination with a synthetic gp120 sequence with optimized codon usage". Virusologiya jurnali. 72 (2): 1497–503. doi:10.1128/JVI.72.2.1497-1503.1998. PMC  124631. PMID  9445053.
  23. ^ Muthumani K, Zhang D, Dayes NS, Hwang DS, Calarota SA, Choo AY, Boyer JD, Weiner DB (September 2003). "Novel engineered HIV-1 East African Clade-A gp160 plasmid construct induces strong humoral and cell-mediated immune responses in vivo". Virusologiya. 314 (1): 134–46. doi:10.1016/S0042-6822(03)00459-8. PMID  14517067.
  24. ^ Oliveira PH, Prather KJ, Prazeres DM, Monteiro GA (September 2009). "Structural instability of plasmid biopharmaceuticals: challenges and implications". Biotexnologiyaning tendentsiyalari. 27 (9): 503–11. doi:10.1016/j.tibtech.2009.06.004. PMID  19656584.
  25. ^ Oliveira PH, Mairhofer J (September 2013). "Marker-free plasmids for biotechnological applications - implications and perspectives". Biotexnologiyaning tendentsiyalari. 31 (9): 539–47. doi:10.1016/j.tibtech.2013.06.001. PMID  23830144.
  26. ^ Kutzler MA, Weiner DB (October 2008). "DNA vaccines: ready for prime time?". Tabiat sharhlari. Genetika. 9 (10): 776–88. doi:10.1038/nrg2432. PMC  4317294. PMID  18781156.
  27. ^ Rodriguez F, Zhang J, Whitton JL (November 1997). "DNA immunization: ubiquitination of a viral protein enhances cytotoxic T-lymphocyte induction and antiviral protection but abrogates antibody induction". Virusologiya jurnali. 71 (11): 8497–503. doi:10.1128/JVI.71.11.8497-8503.1997. PMC  192313. PMID  9343207.
  28. ^ a b Tobery TW, Siliciano RF (March 1997). "Targeting of HIV-1 antigens for rapid intracellular degradation enhances cytotoxic T lymphocyte (CTL) recognition and the induction of de novo CTL responses in vivo after immunization". Eksperimental tibbiyot jurnali. 185 (5): 909–20. doi:10.1084/jem.185.5.909. PMC  2196169. PMID  9120397.
  29. ^ Huebener N, Fest S, Strandsby A, Michalsky E, Preissner R, Zeng Y, Gaedicke G, Lode HN (2008 yil iyul). "A rationally designed tyrosine hydroxylase DNA vaccine induces specific antineuroblastoma immunity". Molekulyar saratonni davolash. 7 (7): 2241–51. doi:10.1158/1535-7163.MCT-08-0109. PMID  18645033.
  30. ^ a b Wunderlich G, Moura IC, del Portillo HA (October 2000). "Genetic immunization of BALB/c mice with a plasmid bearing the gene coding for a hybrid merozoite surface protein 1-hepatitis B virus surface protein fusion protects mice against lethal Plasmodium chabaudi chabaudi PC1 infection". Infektsiya va immunitet. 68 (10): 5839–45. doi:10.1128/IAI.68.10.5839-5845.2000. PMC  101545. PMID  10992493.
  31. ^ Weiner DB, Kennedy RC (1999). "Genetic vaccines". Ilmiy Amerika. 281 (1): 34–41. Bibcode:1999SciAm.281a..50W. doi:10.1038/scientificamerican0799-50. PMID  10396782. Arxivlandi asl nusxasi 2009-03-25. Olingan 2007-11-21.
  32. ^ Widera G, Austin M, Rabussay D, Goldbeck C, Barnett SW, Chen M, Leung L, Otten GR, Thudium K, Selby MJ, Ulmer JB (May 2000). "Increased DNA vaccine delivery and immunogenicity by electroporation in vivo". Immunologiya jurnali. 164 (9): 4635–40. doi:10.4049/jimmunol.164.9.4635. PMID  10779767.
  33. ^ a b Daheshia M, Kuklin N, Kanangat S, Manickan E, Rouse BT (August 1997). "Suppression of ongoing ocular inflammatory disease by topical administration of plasmid DNA encoding IL-10". Immunologiya jurnali. 159 (4): 1945–52. PMID  9257860.
  34. ^ a b Chen Y, Webster RG, Woodland DL (March 1998). "Induction of CD8+ T cell responses to dominant and subdominant epitopes and protective immunity to Sendai virus infection by DNA vaccination". Immunologiya jurnali. 160 (5): 2425–32. PMID  9498786.
  35. ^ Lode HN, Huebener N, Zeng Y, Fest S, Weixler S, Gaedicke G (December 2004). "DNA minigene vaccination for adjuvant neuroblastoma therapy". Nyu-York Fanlar akademiyasining yilnomalari. 1028 (1): 113–21. Bibcode:2004NYASA1028..113L. doi:10.1196/annals.1322.012. PMID  15650237. S2CID  27240738.
  36. ^ Sizemore DR, Branstrom AA, Sadoff JC (October 1995). "Attenuated Shigella as a DNA delivery vehicle for DNA-mediated immunization". Ilm-fan. 270 (5234): 299–302. Bibcode:1995Sci...270..299S. doi:10.1126/science.270.5234.299. PMID  7569980. S2CID  12532901.
  37. ^ Nealon, Cory (25 November 2014). "A hybrid vehicle that delivers DNA". Buffalodagi Nyu-York davlat universiteti. Olingan 16 dekabr 2014.
  38. ^ Jones CH, et al. (Avgust 2014). "Hybrid biosynthetic gene therapy vector development and dual engineering capacity". Amerika Qo'shma Shtatlari Milliy Fanlar Akademiyasi materiallari. 111 (34): 12360–5. Bibcode:2014PNAS..11112360J. doi:10.1073/pnas.1411355111. PMC  4151754. PMID  25114239.
  39. ^ Barry MA, Lai WC, Johnston SA (October 1995). "Protection against mycoplasma infection using expression-library immunization". Tabiat. 377 (6550): 632–5. Bibcode:1995Natur.377..632B. doi:10.1038/377632a0. PMID  7566175. S2CID  4306972.
  40. ^ Fynan EF, Webster RG, Fuller DH, Haynes JR, Santoro JC, Robinson HL (December 1993). "DNA vaccines: protective immunizations by parenteral, mucosal, and gene-gun inoculations". Amerika Qo'shma Shtatlari Milliy Fanlar Akademiyasi materiallari. 90 (24): 11478–82. Bibcode:1993PNAS...9011478F. doi:10.1073/pnas.90.24.11478. PMC  48007. PMID  8265577.
  41. ^ a b v d e Feltquate DM, Heaney S, Webster RG, Robinson HL (March 1997). "Different T helper cell types and antibody isotypes generated by saline and gene gun DNA immunization". Immunologiya jurnali. 158 (5): 2278–84. PMID  9036975.
  42. ^ a b v d Boyle CM, Morin M, Webster RG, Robinson HL (December 1996). "Role of different lymphoid tissues in the initiation and maintenance of DNA-raised antibody responses to the influenza virus H1 glycoprotein". Virusologiya jurnali. 70 (12): 9074–8. doi:10.1128/JVI.70.12.9074-9078.1996. PMC  191015. PMID  8971047.
  43. ^ Sällberg M, Townsend K, Chen M, O'Dea J, Banks T, Jolly DJ, Chang SM, Lee WT, Milich DR (July 1997). "Characterization of humoral and CD4+ cellular responses after genetic immunization with retroviral vectors expressing different forms of the hepatitis B virus core and e antigens". Virusologiya jurnali. 71 (7): 5295–303. doi:10.1128/JVI.71.7.5295-5303.1997. PMC  191766. PMID  9188598.
  44. ^ Banchereau J, Steinman RM (March 1998). "Dendritic cells and the control of immunity". Tabiat. 392 (6673): 245–52. Bibcode:1998Natur.392..245B. doi:10.1038/32588. PMID  9521319. S2CID  4388748.
  45. ^ a b Jakob T, Walker PS, Krieg AM, Udey MC, Vogel JC (September 1998). "Activation of cutaneous dendritic cells by CpG-containing oligodeoxynucleotides: a role for dendritic cells in the augmentation of Th1 responses by immunostimulatory DNA". Immunologiya jurnali. 161 (6): 3042–9. PMID  9743369.
  46. ^ a b Raz E, Tighe H, Sato Y, Corr M, Dudler JA, Roman M, Swain SL, Spiegelberg HL, Carson DA (May 1996). "Preferential induction of a Th1 immune response and inhibition of specific IgE antibody formation by plasmid DNA immunization". Amerika Qo'shma Shtatlari Milliy Fanlar Akademiyasi materiallari. 93 (10): 5141–5. Bibcode:1996PNAS...93.5141R. doi:10.1073/pnas.93.10.5141. PMC  39421. PMID  8643542.
  47. ^ a b Fu TM, Friedman A, Ulmer JB, Liu MA, Donnelly JJ (April 1997). "Protective cellular immunity: cytotoxic T-lymphocyte responses against dominant and recessive epitopes of influenza virus nucleoprotein induced by DNA immunization". Virusologiya jurnali. 71 (4): 2715–21. doi:10.1128/JVI.71.4.2715-2721.1997. PMC  191393. PMID  9060624.
  48. ^ a b v Restifo NP, Bacík I, Irvine KR, Yewdell JW, McCabe BJ, Anderson RW, Eisenlohr LC, Rosenberg SA, Bennink JR (May 1995). "Antigen processing in vivo and the elicitation of primary CTL responses". Immunologiya jurnali. 154 (9): 4414–22. PMC  1952186. PMID  7722298.
  49. ^ a b v Iwasaki A, Stiernholm BJ, Chan AK, Berinstein NL, Barber BH (May 1997). "Enhanced CTL responses mediated by plasmid DNA immunogens encoding costimulatory molecules and cytokines". Immunologiya jurnali. 158 (10): 4591–601. PMID  9144471.
  50. ^ a b Weiss WR, Ishii KJ, Hedstrom RC, Sedegah M, Ichino M, Barnhart K, Klinman DM, Hoffman SL (September 1998). "A plasmid encoding murine granulocyte-macrophage colony-stimulating factor increases protection conferred by a malaria DNA vaccine". Immunologiya jurnali. 161 (5): 2325–32. PMID  9725227.
  51. ^ Tsuji T, Hamajima K, Fukushima J, Xin KQ, Ishii N, Aoki I, Ishigatsubo Y, Tani K, et al. (1997 yil aprel). "Enhancement of cell-mediated immunity against HIV-1 induced by coinnoculation of plasmid-encoded HIV-1 antigen with plasmid expressing IL-12". Immunologiya jurnali. 158 (8): 4008–13. PMID  9103472.
  52. ^ a b Justewicz DM, Webster RG (October 1996). "Long-term maintenance of B cell immunity to influenza virus hemagglutinin in mice following DNA-based immunization". Virusologiya. 224 (1): 10–7. doi:10.1006/viro.1996.0501. PMID  8862394.
  53. ^ Mancini-Bourgine M, Fontaine H, Bréchot C, Pol S, Michel ML (May 2006). "Immunogenicity of a hepatitis B DNA vaccine administered to chronic HBV carriers". Vaktsina. 24 (21): 4482–9. doi:10.1016/j.vaccine.2005.08.013. PMID  16310901.
  54. ^ a b Wolff JA, Dowty ME, Jiao S, Repetto G, Berg RK, Ludtke JJ, Williams P, Slautterback DB (December 1992). "Expression of naked plasmids by cultured myotubes and entry of plasmids into T tubules and caveolae of mammalian skeletal muscle". Hujayra fanlari jurnali. 103. 103 ( Pt 4) (4): 1249–59. PMID  1487500.
  55. ^ Anderson RG, Kamen BA, Rothberg KG, Lacey SW (January 1992). "Potocytosis: sequestration and transport of small molecules by caveolae". Ilm-fan. 255 (5043): 410–1. Bibcode:1992Sci...255..410A. doi:10.1126/science.1310359. PMID  1310359.
  56. ^ a b Casares S, Inaba K, Brumeanu TD, Steinman RM, Bona CA (November 1997). "Antigen presentation by dendritic cells after immunization with DNA encoding a major histocompatibility complex class II-restricted viral epitope". Eksperimental tibbiyot jurnali. 186 (9): 1481–6. doi:10.1084/jem.186.9.1481. PMC  2199124. PMID  9348305.
  57. ^ a b Bennett RM, Gabor GT, Merritt MM (December 1985). "DNA binding to human leukocytes. Evidence for a receptor-mediated association, internalization, and degradation of DNA". Klinik tadqiqotlar jurnali. 76 (6): 2182–90. doi:10.1172/JCI112226. PMC  424340. PMID  3001145.
  58. ^ Bennet RM, Hefeneider SH, Bakke A, Merritt M, Smith CA, Mourich D, Heinrich MC (May 1988). "The production and characterization of murine monoclonal antibodies to a DNA receptor on human leukocytes". Immunologiya jurnali. 140 (9): 2937–42. PMID  2452195.
  59. ^ Corr M, Lee DJ, Carson DA, Tighe H (October 1996). "Gene vaccination with naked plasmid DNA: mechanism of CTL priming". Eksperimental tibbiyot jurnali. 184 (4): 1555–60. doi:10.1084/jem.184.4.1555. PMC  2192808. PMID  8879229.
  60. ^ Chattergoon MA, Robinson TM, Boyer JD, Weiner DB (June 1998). "Specific immune induction following DNA-based immunization through in vivo transfection and activation of macrophages/antigen-presenting cells". Immunologiya jurnali. 160 (12): 5707–18. PMID  9637479.
  61. ^ a b Torres CA, Iwasaki A, Barber BH, Robinson HL (May 1997). "Differential dependence on target site tissue for gene gun and intramuscular DNA immunizations". Immunologiya jurnali. 158 (10): 4529–32. PMID  9144463.
  62. ^ Franco A, Guidotti LG, Hobbs MV, Pasquetto V, Chisari FV (August 1997). "Pathogenetic effector function of CD4-positive T helper 1 cells in hepatitis B virus transgenic mice". Immunologiya jurnali. 159 (4): 2001–8. PMID  9257867.
  63. ^ Mancini M, Hadchouel M, Davis HL, Whalen RG, Tiollais P, Michel ML (October 1996). "DNA-mediated immunization in a transgenic mouse model of the hepatitis B surface antigen chronic carrier state". Amerika Qo'shma Shtatlari Milliy Fanlar Akademiyasi materiallari. 93 (22): 12496–501. Bibcode:1996PNAS...9312496M. doi:10.1073/pnas.93.22.12496. PMC  38020. PMID  8901610.
  64. ^ Doolan DL, Hoffman SL (July 1999). "IL-12 and NK cells are required for antigen-specific adaptive immunity against malaria initiated by CD8+ T cells in the Plasmodium yoelii model". Immunologiya jurnali. 163 (2): 884–92. PMID  10395683.
  65. ^ Cardoso AI, Blixenkrone-Moller M, Fayolle J, Liu M, Buckland R, Wild TF (November 1996). "Immunization with plasmid DNA encoding for the measles virus hemagglutinin and nucleoprotein leads to humoral and cell-mediated immunity". Virusologiya. 225 (2): 293–9. doi:10.1006/viro.1996.0603. PMID  8918915.
  66. ^ a b v Sato Y, Roman M, Tighe H, Lee D, Corr M, Nguyen MD, Silverman GJ, Lotz M, Carson DA, Raz E (July 1996). "Immunostimulatory DNA sequences necessary for effective intradermal gene immunization". Ilm-fan. 273 (5273): 352–4. Bibcode:1996Sci...273..352S. doi:10.1126/science.273.5273.352. PMID  8662521. S2CID  9333197.
  67. ^ Weiss R, Leitner WW, Scheiblhofer S, Chen D, Bernhaupt A, Mostböck S, Thalhamer J, Lyon JA (October 2000). "Genetic vaccination against malaria infection by intradermal and epidermal injections of a plasmid containing the gene encoding the Plasmodium berghei circumsporozoite protein". Infektsiya va immunitet. 68 (10): 5914–9. doi:10.1128/IAI.68.10.5914-5919.2000. PMC  101554. PMID  10992502.
  68. ^ a b Sedegah M, Weiss W, Sacci JB, Charoenvit Y, Hedstrom R, Gowda K, Majam VF, Tine J, Kumar S, Hobart P, Hoffman SL (June 2000). "Improving protective immunity induced by DNA-based immunization: priming with antigen and GM-CSF-encoding plasmid DNA and boosting with antigen-expressing recombinant poxvirus". Immunologiya jurnali. 164 (11): 5905–12. doi:10.4049/jimmunol.164.11.5905. PMID  10820272.
  69. ^ Barouch DH, Santra S, Steenbeke TD, Zheng XX, Perry HC, Davies ME, Freed DC, Craiu A, Strom TB, Shiver JW, Letvin NL (August 1998). "Augmentation and suppression of immune responses to an HIV-1 DNA vaccine by plasmid cytokine/Ig administration". Immunologiya jurnali. 161 (4): 1875–82. PMID  9712056.
  70. ^ a b Krieg AM, Yi AK, Matson S, Waldschmidt TJ, Bishop GA, Teasdale R, Koretzky GA, Klinman DM (April 1995). "CpG motifs in bacterial DNA trigger direct B-cell activation". Tabiat. 374 (6522): 546–9. Bibcode:1995Natur.374..546K. doi:10.1038/374546a0. PMID  7700380. S2CID  4261304.
  71. ^ Klinman DM, Yamshchikov G, Ishigatsubo Y (April 1997). "Contribution of CpG motifs to the immunogenicity of DNA vaccines". Immunologiya jurnali. 158 (8): 3635–9. PMID  9103425.
  72. ^ Krieg AM, Wu T, Weeratna R, Efler SM, Love-Homan L, Yang L, Yi AK, Short D, Davis HL (October 1998). "Sequence motifs in adenoviral DNA block immune activation by stimulatory CpG motifs". Amerika Qo'shma Shtatlari Milliy Fanlar Akademiyasi materiallari. 95 (21): 12631–6. Bibcode:1998PNAS...9512631K. doi:10.1073/pnas.95.21.12631. PMC  22882. PMID  9770537.
  73. ^ a b Klinman DM, Yi AK, Beaucage SL, Conover J, Krieg AM (April 1996). "CpG motifs present in bacteria DNA rapidly induce lymphocytes to secrete interleukin 6, interleukin 12, and interferon gamma". Amerika Qo'shma Shtatlari Milliy Fanlar Akademiyasi materiallari. 93 (7): 2879–83. Bibcode:1996PNAS...93.2879K. doi:10.1073/pnas.93.7.2879. PMC  39727. PMID  8610135.
  74. ^ Yi AK, Chace JH, Cowdery JS, Krieg AM (January 1996). "IFN-gamma promotes IL-6 and IgM secretion in response to CpG motifs in bacterial DNA and oligodeoxynucleotides". Immunologiya jurnali. 156 (2): 558–64. PMID  8543806.
  75. ^ Letvin NL, Montefiori DC, Yasutomi Y, Perry HC, Davies ME, Lekutis C, Alroy M, Freed DC, Lord CI, Handt LK, Liu MA, Shiver JW (August 1997). "Potent, protective anti-HIV immune responses generated by bimodal HIV envelope DNA plus protein vaccination". Amerika Qo'shma Shtatlari Milliy Fanlar Akademiyasi materiallari. 94 (17): 9378–83. Bibcode:1997PNAS...94.9378L. doi:10.1073/pnas.94.17.9378. PMC  23198. PMID  9256490.
  76. ^ Sedegah M, Jones TR, Kaur M, Hedstrom R, Hobart P, Tine JA, Hoffman SL (June 1998). "Boosting with recombinant vaccinia increases immunogenicity and protective efficacy of malaria DNA vaccine". Amerika Qo'shma Shtatlari Milliy Fanlar Akademiyasi materiallari. 95 (13): 7648–53. Bibcode:1998PNAS...95.7648S. doi:10.1073/pnas.95.13.7648. PMC  22711. PMID  9636204.
  77. ^ Rogers WO, Baird JK, Kumar A, Tine JA, Weiss W, Aguiar JC, Gowda K, Gwadz R, Kumar S, Gold M, Hoffman SL (September 2001). "Multistage multiantigen heterologous prime boost vaccine for Plasmodium knowlesi malaria provides partial protection in rhesus macaques". Infektsiya va immunitet. 69 (9): 5565–72. doi:10.1128/IAI.69.9.5565-5572.2001. PMC  98670. PMID  11500430.

Qo'shimcha o'qish